產品名稱：NUTU-19-GFP大鼠卵巢癌細胞-綠色標記 含STR鑒定

·         產品編號：

·         細胞數量：NUTU-19-GFP

·         細胞種屬： 大鼠

·         生長特性： 貼壁

·         培養基： DMEM-H

·         形態特征： 成纖維細胞樣

·         傳代方法： 1:3傳代,2-3天傳一代

·         培養條件： 胎牛血清至終濃度為10％。環境：空氣，95％;二氧化碳（CO2），5％；溫度，37℃

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·         細胞凍存： 液氮凍存（凍存液基礎培養基+20%FBS+10%DMSO）

·         細胞運輸： 干冰運輸（2ml凍存管）或活細胞運輸（T25瓶）

細胞傳代方法：1：2-1：3傳代；每周換液2-3次。

細胞的凍存：目前，細胞凍存常用的技術是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數生長期的細胞，在凍存前一天*換液。將多個培養瓶中的細胞培養液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養液。用吸管吸取培養液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的*培養基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或冷凍塑料管中，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要*封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數)。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態部分存放２小時，*沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，*取出一只安瓿細胞復蘇培養，觀察生長情況，然后再繼續凍存。

公司細胞庫凍存并保種有2300多種各類細胞系。針對每種不同的細胞系，公司摸索并積累了大量細胞培養條件和優化參數，為您的細胞實驗保駕護航。細胞培養是生命科學研究中基礎、也是常用的實驗手段。從凍存→復蘇→傳代→實驗，在每一次細胞培養的過程中我們都是精心呵護，小心培養，心里都是默默承諾：我要護你一世周全！可是可是……無數次細胞都因污染而離我而去，投入的不只是我們貌美如花的青春，還有那一去不復返的經費！在細胞生物學，生物化學，免疫學，神經生物學，病理學……只要涉及細胞的研究領域，都面臨著支原體污染的威脅。在眾多污染物中，也就屬支原體狡猾了，他善于隱藏自己，因為被支原體污染的細胞不會馬上死亡，但會改變細胞的新陳代謝，甚至會改變細胞的基因表達譜，我們就這樣被欺騙了無數次，誰讓我們就是個看“顏值”的花癡了。可是我們通過幾百次的實驗經驗中總結出來，當你的細胞出現了這些癥狀時：生長速率改變；活性減弱；形態改變；染色體畸變；轉染效率顯著降低；細胞復蘇后存活率降低……。那你就得千萬小心了，也許你的細胞已經被支原體欺凌了！

培養細胞真的不難，關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養皿、培養基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數，傳相應數目的細胞到培養皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候*給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養細胞。