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小鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒

來源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2019年10月22日 09:32  

【詳細(xì)描述】: 
中文名稱:
小鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒
規(guī)格:48T/96T
包裝:elisa試劑盒正規(guī)包裝

品牌:酶科
儲(chǔ)存溫度::-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))
有效期:6個(gè)月
1-2個(gè)工作日發(fā)貨,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),收到標(biāo)本起一周內(nèi)提供原始數(shù)據(jù)和終數(shù)據(jù)
ELISA各種樣本收集、處理、保存方法
1.血清標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本,全血標(biāo)本室溫放置1-2h或4℃過夜,然后4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
2.血漿標(biāo)本收集、處理、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或肝素鈉或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的采血管或離心管采集血液標(biāo)本,室溫混合20min左右,然后4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。避免使用溶血或高血脂的標(biāo)本。
3.尿液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
4.唾液標(biāo)本收集、處理、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
5.細(xì)胞標(biāo)本收集、處理、保存方法:
(1)細(xì)胞培養(yǎng)上清
取細(xì)胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,4℃、3000rpm/min離心20min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。
(2)細(xì)胞裂解液
收集細(xì)胞培養(yǎng)液,4℃、3000rpm/min離心20min,棄去上清,用預(yù)冷的PBS(0.01M,PH7.4)洗滌三次。加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)胞。通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞充分裂解。然后4℃、10000rpm/min離心20min,除去細(xì)胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長(zhǎng)時(shí)間),避免反復(fù)凍融。

 

試劑盒組成及保存:

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片(48)

2片(96)

 

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

 

標(biāo)準(zhǔn)品

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1瓶

1.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

3 ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3 ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

濃縮洗滌液

(20ml×20倍)×1瓶

(20ml×30倍)×1瓶

2-8℃保存

 

小鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒

三.注意事項(xiàng)

 

 

①儲(chǔ)存:試劑盒中各種試劑請(qǐng)按說明書提示合理存放。儲(chǔ)存及溫育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶需旋緊以防止蒸發(fā)和微生物污染,否則可能會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果。

 

②酶標(biāo)板:剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。暫時(shí)不用板條應(yīng)拆下后放入備用自封袋,按推薦溫度存放。

 

③加樣:加樣和加同一試劑時(shí),di一孔與后孔之間加樣時(shí)間間隔過大將導(dǎo)致不同的“預(yù)溫育”時(shí)間,從而明顯的影響到測(cè)量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性,每次的加樣時(shí)間控制在 10 分鐘之內(nèi),推薦設(shè)置復(fù)孔。

 

④溫育:為防止樣品蒸發(fā),實(shí)驗(yàn)時(shí)必須給酶標(biāo)板覆膜,洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài)。嚴(yán)格遵守給定的溫育時(shí)間和溫度。

 

⑤洗板:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在吸水紙或干布上拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水。讀數(shù)前要清除酶標(biāo)板底部殘留的液體和手指印,以免影響酶標(biāo)儀讀數(shù)。

 

⑥試劑配制:試劑盒在運(yùn)輸過程中會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋,因此使用 1000 轉(zhuǎn)/分離心一分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。取用前請(qǐng)用移液器小心吹打 4-5 次使溶液混勻。所有試劑請(qǐng)按說明書指示請(qǐng)配制。

 

⑦顯色時(shí)間的控制:加入底物后,請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如每隔五分鐘),如梯度已經(jīng)很明顯,請(qǐng)?zhí)崆凹咏K止液終止反應(yīng),以避免顏色過深,影響酶標(biāo)儀讀數(shù)。

 

⑧底物:請(qǐng)避光保存底物。在儲(chǔ)存和溫育時(shí),避免強(qiáng)光直接照射。

 

⑨混勻:充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,使用低頻率,如無微量振蕩器,可以在反應(yīng)前手工輕輕敲擊酶標(biāo)板框混勻。

 

提示:不同批號(hào)的試劑盒組分不能混用(洗滌液和終止液除外)。

 

⑩關(guān)于樣品回收率

 

1)本試劑盒以測(cè)定重組豬胰蛋白酶的抗原性而非活力來推測(cè)殘留量,因此試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)品采用胰蛋白酶的消光系數(shù)(E1%1cm=13.6D, 即當(dāng) A280nm=1.36 時(shí),胰蛋白酶濃度為 1mg/ml)來計(jì)算其蛋白含量,以大限度保持質(zhì)控的和穩(wěn)定性。

 

2)不同計(jì)量方法以及產(chǎn)品純度的差別可以導(dǎo)致不同來源、不同批次產(chǎn)品中胰蛋白酶的蛋白含量不*一致,也會(huì)造成回收率的差異。

 

3)為避免上述因素影響,建議將用作回收率測(cè)試的樣品采用分光光度法(A280nm)估算蛋白含量,再稀釋至適合的濃度用于回收率測(cè)試,盡量減少回收率的誤差。

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