人胰淀粉酶(PAMY)ELISA試劑盒的詳細資料:
ELISA試劑盒規格:
(1)96T可用做84個標本,12個標準曲線;
(2)48T可用做42個標本,6個標準曲線;
ELISA試劑盒組成:
(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);
(2)酶標記的抗原或抗體(結合物);
(3)酶的底物;
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制血清(定量測定中);
(5)結合物及標本的稀釋液;
(6)洗滌液;
(7)酶反應終止液。
保存條件:2-8℃低溫保存;
保質期:六個月;
用途:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷。
人胰淀粉酶(PAMY)ELISA試劑盒使用建議
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
ELISA試劑盒廠家招代理商,科研ELISA試劑盒測定中可能會出現的問題及可能的原因
問 題 可能的原因(非試劑盒本身的原因)
1.弱陽性質控樣本檢測不出 溫育的時間或溫度不夠;顯色反應時間太短;所用配制緩沖液的蒸餾水有問題
2.測定的重復性差 (相同樣本兩次測定結果不一致) 這是典型的由測定操作引起的問題,包括
(1)加樣本及試劑量不準;孔間不一致;
(2)加樣過快,孔間發生污染;
(3)加錯樣本;
(4)加樣本及試劑時,加在孔壁上部非包被區;
(5)不同批號試劑盒中組分混用;
(6)溫育時間、洗板、顯色時間不一致;
(7)孔內污染雜物;
(8)酶標儀濾光片不正確;
(9)血清標本未*凝固即加入,反應孔內出現纖維蛋白凝固或殘留血細胞,易出現假陽性反應等。
3.白板
(陽性對照不顯色) (1)漏加酶結合物;
(2)洗板液配制中出現問題,如量筒不干凈,含酶抑制物(如疊氮鈉)等。
(3)漏加顯色劑A或B;
(4)終止劑當顯色劑使用。
4.全部板孔均有顯色 (1)洗板不干凈;
(2)顯色液變質;
(3)加底物的吸光受酶污染;
(4)洗板液受酶等污染。
不論ELISA試劑盒儀器售后有多好,也很難做到工程師隨叫隨到,因為工程師們往往是公司中zui忙碌的人。要是酶標儀報錯無法使用,而我們的實驗又等不了怎么辦?據資深工程師介紹,其實他遇到的大多數維修問題都是很簡單的。
以下就是一些酶標儀報錯的常見兩點,這些實用小標簽一定可以幫你成為動手達人,一解實驗室的燃眉之急。
*、酶標儀是一種精密的光學儀器,ELISA試劑盒強光自然會有巨大影響,所以是不能放在窗邊的。
第二、別擔心,儀器多半不是大毛病,只不過被大型離心機影響了。大功率設備產生的磁場會干擾其他電器,此外振蕩也會影響酶標儀微孔板中的液面高度,導致檢測結果不準確。
【ELISA試劑盒實驗過程中遇到的各種疑問】
1,水質原因:點復溶液驗證,用娃哈哈礦泉水代替
2,實驗操作原因:
吸取到其它相吹干,準確的取液吹干
離心不*,延長離心時間
樣本的污染,更換樣本
乳化未處理*,溫浴(70℃)處理乳化現象
3,儀器試劑原因:
離心管未清洗干凈,正確的洗滌器具
有機溶劑的影響,做試劑空白看影響結果
4,衍生化試劑原因(長時間衍生化試劑變質),更換衍生化試劑
5,與曲線好壞相關,保證曲線的正常
ELISA試劑盒回收率
1.空白管陽性高
樣本本身就是陽性樣本,換陰性樣本做回收率
空白管在實驗中被污染,實驗中防止交叉污染
水質原因用,娃哈哈礦泉水代替
2.偏高
添加量不準確,的添加量
添加濃度不適合,添加合適的濃度
取液吹干量多,準確的取液吹干
取到其它相層液體,取需用相吹干
復溶液未稀釋或加入量少,正確的稀釋復溶液
3.偏低
添加量不準確,的添加量
添加濃度不適合,添加合適的濃度
取液吹干量少,準確的取液吹干
復溶液稀釋錯誤或加入量多,正確的稀釋復溶液
而用ELISA檢測抗體,已獲得對多種傳染病和寄生蟲病的血清學診斷,亦開始廣泛用于現場流行病學調查。在寄生蟲病方面,它用于對瘧原蟲、阿米巴、利日曼原蟲、錐蟲、血吸蟲、囊蟲、弓漿蟲、肺吸蟲、肝吸蟲、血絲蟲、旋毛蟲病等血清學診斷,這對人醫和獸醫都很重要。在病原微生物方面已用于檢測鏈球菌、沙門氏菌、布氏桿菌、結核桿菌、麻瘋桿菌、霍亂弧菌、淋球菌、假絲酵母菌等的抗體,還可用于破傷風抗毒素和霍亂弧菌抗毒素的測定以及檢測斑疹傷寒立克次氏體感染后的抗體作診斷,也可用于對立克次氏體的種屬鑒別,還有用于檢測鸚鵡熱衣原體抗體的報導。ELISA也可應用于以下病毒抗體檢測:流感病毒、腮腺炎病毒、麻診、風疹、輪狀病毒、皰疹病毒、巨細胞病毒、EB病毒、腺病毒、腸道病毒、腦炎病毒、黃熱病毒、狂犬病毒和脊髓灰質炎病毒等,其敏感性都超過目前常用的檢測方法。此外,還可用于鑒定病毒型別,例如皰疹病毒。在免疫性疾病方面有試用作自身疫病抗體測定以及對過敏的診斷,例如檢測各種過敏原的抗體、DNA抗體及甲狀腺球蛋白抗體,紅斑性痕瘡抗體等等。在衛生學方面,可用于檢測食品中葡萄球菌腸毒素及沙門氏菌毒素等等。
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