名稱: 人胃泌素細胞抗體(GCA)ELISA試劑盒
Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡便,結果判斷較客觀等因素,已廣泛應用在免疫學檢驗的各領域中。ELISA檢測試劑盒是用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環節的質量保證才能充分發揮其方法學的優點
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。
上海琛藝供應的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等
試劑盒組成及保存:
試劑盒組成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
說明書 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1個 | 1個 | |
酶標包被板 | 1×48 | 1×96 | |
標準品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶標試劑 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
樣品稀釋液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑A液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
顯色劑B液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
終止液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
濃縮洗滌液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
人胃泌素細胞抗體(GCA)ELISA試劑盒
技術問答
我能否在實驗開始前一天收集樣品?
◆ 除非試劑盒內說明書特別說明不允許,一般都可以。如果收集的樣品不能夠及時進行檢測,請保存至-20℃或者按照說明書進行保存。應避免反復凍融。
◆ -20℃是推薦的冷藏保存溫度。解凍的平衡過程可能會導致樣品的降解。
我是否必需按照試劑盒內說明書中的方法準備樣品?
◆ 推薦的樣品準備方法是經過實驗驗證的的方法,所以推薦按照說明書上的方法制備樣品。
我能否不用推薦的收集方法來收集血漿?
◆ 每一次按照推薦步驟操作的測定都是經過驗證可行的。在某些測定中有些抗凝劑是不被推薦的。具體請參看說明書。
◆ 有些待檢測的分析物也存在于血小板中,因此,推薦使用低血小板血漿。正確的收集操作方法請參看說明書。
我能否使用自己的稀釋液或者緩沖液?
◆ 每個試劑盒中都含有按配方配制的與特異性樣品種屬相配套的稀釋液,以確保待檢測的樣品被正確稀釋。具體請參看說明書。
建議
◆ 確定待檢測的樣品在收集和制備時保證無菌操作。
◆ 如果要檢測多個樣品,將樣品隔離并標記清楚以防相互污染。
◆ 檢測前,將樣品離心除去顆粒。將樣品轉移至新的離心管內,混合均勻。
◆ 在混合樣品時,使用容積至少比樣品體積大50%的離心管以保證混合充分。
我沒有足量的稀釋液去稀釋所有的樣品,怎么辦?
◆ 試劑盒內提供說明書中所的足量的稀釋液。能保證所有的標準品和樣品檢測兩次。
◆ 如果沒有推薦的稀釋度,或者需要大量稀釋,請在實驗前計算出所需的稀釋液總量,然后技術服務部門獲取額外的稀釋液。
我能否使用試劑盒內非推薦的樣品類型?
◆ 試劑盒內說明書中所的樣品類型是經過驗證可行的。其它未推薦的樣品類型是沒有經過任何檢測的。
我使用對照的檢測結果都在范圍外,為什么?
◆ 如果使用對照,其濃度應該是在某一特定范圍內。如果對照值在范圍外,則是無效測定。
試驗操作中,每一個小細節都直接決議著試驗的成功用與否,所以每一個過程都不能大意,以下內容針對細胞因子ELISA試劑盒的試驗操給出一些小主張:
1、每次試驗測定的一起做標準曲線,。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔zui高濃度的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n)。
2、制造試劑時,要用旋渦混合儀混勻。加入孔內的試劑,充沛混勻對測試成果尤為重要,運用微量振蕩器(運用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反響前手藝悄悄晃動酶標板1分鐘,例如做圓周動作,使加入孔中的反響液混勻。
3、從2-8℃取出的試劑盒,在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
4、嚴格按照說明書的操作進行,試驗成果斷定必須以酶標儀讀數為準。
5、不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前運用。
6、試驗用酶標儀應嚴格按運用說明書標準操作,并在運用前充沛預熱。
7、手藝洗板應注意:甩掉酶標板內的液體;在試驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。主動洗板:如果有主動洗板機,應在嫻熟運用后再用到正式試驗過程中。
8、底物B對光敏感,防止長時間暴露于光下。
9、為防止穿插污染,要防止重復運用手中的吸頭和封板膜。
10、所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按生物廢棄物處理。停止液為2M硫酸,運用時必須注意安全。
11、各過程加樣均應運用加樣器,并常常校準其準確性,以防止試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦運用排槍加樣。
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