小鼠α干擾素(IFN-α)科研ELISA試劑盒*

ELISA快速檢測技術越來越多的用于疾病診斷、食品安全檢測中，那么ELISA試劑盒的主要組成成份是什么呢？根據ELISA試劑盒的應用范圍，可將ELISA試劑盒分為拿幾種呢？
ELISA試劑盒主要的組成成份如下：

(1)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)；
(2)C的抗原或抗體(結合物)；
(3)酶的底物；
(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考標準品和控制血清(定量測定中)；
(5)結合物及標本的稀釋液；
(6)洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；
(7)酶反應終止液，常用的HRP反應終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的終體積而異，在板式ELISA中一般采用2mol/L。

常見的ELISA試劑盒
一、食品安全檢驗ELISA試劑盒
是指食品中的激素、藥物、霉菌毒素、過敏原殘留、轉基因產品的檢測試劑盒，以及微生物、維生素等的檢測產品。
包括植物病毒、細菌、真菌、植物激素和轉基因作物的農業診斷試劑盒，以及動植物疾病診斷類如豬、牛、羊、馬等家畜和禽類以及寵物類檢測試劑盒。
二、生物原裝ELISA試劑盒以及各類國產ELISA試劑盒
1、細胞因子檢測試劑盒：
如白介素、選擇素、集落刺激因子，腫瘤壞死因子，干擾素，轉化生長因子，趨化因子，細胞因子受體，粘附分子，生長因子，凋亡因子等等
2、心肌梗塞檢測ELISA試劑盒
如肌鈣蛋白，肌紅蛋白，C-反應蛋白等等
3、內分泌檢測ELISA試劑盒
如甲狀腺，胰腺，性激素，孕酮，睪酮，生長激素，生長抑素，內皮素，皮質醇，骨鈣素，催乳素，促腎上腺皮質激素，促卵泡素，雌二醇，雌三醇，5-羥色胺，17-羥孕酮等等
4、肝纖維化檢測ELISA試劑盒
如纖維連接蛋白，透明質酸，膠原，基質金屬蛋白酶抑制因子，基質金屬蛋白酶，層粘蛋白等等
5、自身免疫檢測ELISA試劑盒
如甲狀腺，鹽水可提取核抗原抗體(ENA)，抗核抗體，DNA，抗心磷脂抗體，類風濕因子，循環免疫復合物，抗胰島細胞抗體，胰蛋白酶原，Sm，大皰性類皰瘡，蛋白酶，短膜蟲法，肝-腎，肝-腎-胃，肌內膜抗體，角蛋白抗體，抗核抗體，抗核糖體蛋白抗體，抗聚角蛋白微絲蛋白抗體，抗鏈O，抗卵巢抗體，抗平滑肌抗體，抗線粒體抗體，等等
7、優生優育檢測ELISA試劑盒
如早早孕，新生兒TSH，胎膜早破檢測，抗子宮內膜抗體，抗心磷脂抗體，抗透明帶抗體，抗卵細胞透明帶抗體，抗卵巢抗體，抗精子抗體，巨細胞病毒，弓形體，風疹病毒，分娩預測，單核白細胞增多癥，單純皰疹病毒，促卵泡素，促黃體生成素，便隱血試紙，HCG等等
8、傳染病檢測ELISA試劑盒
如幽門螺桿菌，乙腦，乙肝，丙肝，丁肝，戊肝，庚肝，衣原體，性病，腺病毒，微小病毒B19，天皰瘡，水痘-帶狀皰疹病毒，生殖支原體，傷寒，沙眼，腮腺炎，人型支原體，麻疹，輪狀病毒，流行性出血熱，淋球菌，萊姆病，柯薩奇，抗解尿支原體，軍團菌，結核，膠原，尖銳濕疣，甲肝，脊髓灰質炎，急性胰腺炎尿胰蛋白酶，霍亂，呼吸道合胞病毒，肝吸蟲，副流感，肺炎，帶狀皰疹，傳染性單核細胞增多癥，層粘蛋白，布魯氏桿菌，百日咳，白喉，艾柯病毒，EB 病毒，A族鏈球菌等等
9、特種蛋白檢測ELISA試劑盒
如免疫球蛋白，抗鏈O-aso，類風濕因子RF，C反應蛋白，微量白蛋白，β-2微球蛋白human，鐵蛋白，轉鐵蛋白transferrin等等
10、腫瘤標志物檢測ELISA試劑盒
如腫瘤標志物，組織多肽抗原，腫瘤相關因子，胰腺癌，直腸癌，細胞角蛋白片段，胃腸癌，鐵蛋白，糖鏈抗原，神經特異性稀醇化酶，上皮膜抗原，乳腺癌，人抗小鼠抗體，前列腺，甲胎蛋白，肝癌，大腸癌，肺癌，大小便隱血檢測，癌胚抗原，β-2微球蛋白等等

樣本

0分鐘左右（2000-3000轉/分）。

仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。

2. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。

5. 組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

小鼠α干擾素(IFN-α)科研ELISA試劑盒*-elisa操作步驟：

1. 標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

elisa注意事項：

1． 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2． 濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3． 各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6． 底物請避光保存。

7． 嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8． 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9． 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

計算：

以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標， 在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD 值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋 倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標 準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值 代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋 倍數，即為樣品的實際濃度。

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

上海琛藝實業經過10年ELISA試劑盒技術的積累與沉淀，不斷創新突破，始終以"提供zuei好的質量給客戶，為客戶的利益服務"為理念。主要包括：小鼠ELISA試劑盒、人ELISA試劑盒、大鼠ELISA試劑盒、豬ELISA試劑盒、牛ELISA試劑盒等。