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RD細(xì)胞|RD人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明STR

來(lái)源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2019年09月04日 09:31  

上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司經(jīng)過(guò)數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司新引進(jìn)細(xì)胞上千株,其中人的已通過(guò)STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購(gòu)。。。。。。

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產(chǎn)品名稱:RD細(xì)胞|RD人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明STR

包裝:內(nèi)層無(wú)菌自封袋;防壓泡沫盒;外層防壓保溫氣泡袋;說(shuō)明書(shū)
細(xì)胞來(lái)源:ATCCsciencellICLC
貨期:1-2
運(yùn)輸方式:快遞運(yùn)輸
售后:收到細(xì)胞后12天,如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有質(zhì)量問(wèn)題(如污染,死亡,快遞運(yùn)輸?shù)仍颍r(shí),應(yīng)出具書(shū)面質(zhì)量問(wèn)題報(bào)告并及時(shí)通知銷售人員,我們將盡快為您解決!

細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊模瑒t采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)

RD細(xì)胞|RD人惡性胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明STR操作說(shuō)明:

1)對(duì)于常溫運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,收到細(xì)胞后,檢查是否有運(yùn)輸問(wèn)題,即細(xì)胞培養(yǎng)瓶或管是否破損,細(xì)胞培養(yǎng)液是否溢出。若沒(méi)有運(yùn)輸問(wèn)題,請(qǐng)75%酒精消毒后,保留封口膜,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置。嚴(yán)格檢查培養(yǎng)箱的參數(shù):溫度,濕度和CO2濃度。細(xì)胞靜置時(shí)間一般為6-12小時(shí)后,細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,即可開(kāi)始后續(xù)操作。選用正確的細(xì)胞培養(yǎng)體系,A2780(人卵巢癌細(xì)胞)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的培養(yǎng)條件進(jìn)行培養(yǎng)。條件允許,培養(yǎng)的前三天內(nèi)做細(xì)胞拍照記錄,通過(guò)郵件發(fā)送給我們做及時(shí)狀態(tài)跟蹤。

2)對(duì)于干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞,請(qǐng)取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。然后將其復(fù)蘇培養(yǎng),次日更換培養(yǎng)液。

注意事項(xiàng):

1)細(xì)胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開(kāi)封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以離心去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長(zhǎng)至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問(wèn)題解決。

2)對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的貼壁細(xì)胞:可采用適當(dāng)?shù)奶岣吲囵B(yǎng)基中血清濃度,或隔日換液的方法來(lái)保證細(xì)胞的狀態(tài)和生長(zhǎng)速度。

3)對(duì)于生長(zhǎng)不均的貼壁細(xì)胞:在培養(yǎng)過(guò)程中若出現(xiàn)細(xì)胞分布明顯不均時(shí)(即某一區(qū)域細(xì)胞已重疊生長(zhǎng),而旁邊則為一塊空白),此時(shí)可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重新打散,貼壁,加入新培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 

下面介紹幾種細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中常見(jiàn)的污染:

一)桿菌污染:培養(yǎng)基中加入抗生素可以減少此種污染,但也不是的。

二)支原體污染:傳說(shuō)中的黑焦蟲(chóng),長(zhǎng)得暴快。24小時(shí)就滿視野都是了。污染源大多數(shù)情況下是培養(yǎng)用血清。

三)念珠菌污染:似乎無(wú)處不在,而且頑固得很。長(zhǎng)得暴快(12h就能在細(xì)胞上面密布)。培養(yǎng)液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細(xì)胞上,高倍鏡下呈樹(shù)枝狀或葡萄狀。

四)霉菌污染、比較常見(jiàn)的一種污染,常常來(lái)源于污染的空氣、水和器械。

 

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