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人精氨酸酶(Arg)ELISA檢測試劑盒使用說明書

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2019年09月03日 11:09  

名稱:人精氨酸酶(Arg)ELISA檢測試劑盒使用說明書

英文名稱:human IgM(RhV-IgM)ELISA kit 

規(guī)格: 96T/48T

品牌:酶科

種屬:人ELISA試劑盒

檢測波長:450 nm

所需樣本體積: 50-100ul

 適用范圍:僅供科研

保存及有效期:2-8℃,六個月

 檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。

上海琛藝供應(yīng)的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等

二.訂貨信息:

ELISA試劑盒組成成分:

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

8孔×12條

8孔×6條

標準品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書進行稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

 

ELISA的基本原理有三條: 
(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;
(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學和酶學活性; 
(3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。  

科研事業(yè)單位長期保持著合作關(guān)系,公司的產(chǎn)品質(zhì)量及服務(wù)態(tài)度得到了他們的一致認可。琛藝本著客

戶至上的原則為客戶提供高質(zhì)量高品質(zhì)的產(chǎn)品,公司承諾如有質(zhì)量的問題兔費包退換(非人為因素造成的)。

標簽:人精氨酸酶(Arg)ELISA檢測試劑盒使用說明書

ELISA方法的基本原理是酶分子與抗體或抗體分子共價結(jié)合,此種結(jié)合不會改變抗體的免疫學特性,也不影響酶的生物學活性。此種酶標記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型,出現(xiàn)顏色反應(yīng)。因此,可通過底物的顏色反應(yīng)來判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng),顏色反應(yīng)的深淺與標本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應(yīng)可通過ELISA檢測儀進行定量測定,這樣就將酶化學反應(yīng)的敏感性和抗原抗體反應(yīng)的特異性結(jié)合起來,使ELISA方法成為一種既特異又敏感的檢測方法。

說明書等其他詳細信息請在線咨詢我公司銷售人員!

 

三、技術(shù)流程               

雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

間接法(檢測未知抗體)

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

ELISA試劑盒檢測中血漿一般可視為與血清同等的標本,標本中干擾性物質(zhì)是引起檢測后結(jié)果偏高或偏低的主要原因,干擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類:
1.內(nèi)源性物質(zhì) 
     常見的干擾物質(zhì)有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。 
(1)類風濕因子 :血清中IgM、IgG型類風濕因子(RF)在ELISA試劑盒檢測中,可與ELISA試劑盒系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標記二抗的FC段直接結(jié)合,從而導致檢測OD值偏高。
(2)補體 :ELISA試劑盒系統(tǒng)中固相一抗和標記二抗過程中,抗體分子發(fā)生變構(gòu),其FC段的補體C1q分子結(jié)合位點被暴露出來,使C1q 可以將二者連接起來,從而造成檢測OD值偏高。
(3)嗜異性抗體 
     人類血清中含有能與嚙齒類動物(如鼠等)Ig (s) 結(jié)合的天然嗜異性抗體,可將ELISA試劑盒系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來,也能造成檢測OD值偏高。
此外血清中嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過高、膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等,均對ELISA試劑盒測定結(jié)果有干擾作用。
2.外源性物質(zhì) 
      外源性物質(zhì)常常是由于用于ELISA試劑盒測定的血標本的采集、貯存等不當所致。如標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存過久、標本凝集 不全和采血管中添加物等影響。 
(1)標本溶血 
     由于各種人為原因引起的標本溶血,均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過氧化物酶為標記的ELISA試劑盒測定中,會導致非特異性顯色,干擾測定結(jié)果。
(2)標本受細菌污染 :因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。

 

上海琛藝實業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司酶科品牌ELISA試劑盒研發(fā)的種屬涵蓋:人,大鼠,小鼠,豬,牛,羊,兔,植物,農(nóng)殘類,魚類等。具有完善的實驗技術(shù)開發(fā)平臺,成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng),熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù),結(jié)合公司的研發(fā)團隊,可以有效的保證公司產(chǎn)品強的穩(wěn)定性和高的準確性,同時又具有競爭力的價格。公司目前主要提供生化試劑、分子生物學試劑及試劑盒,各種抗體及免疫學試劑盒、實驗耗材等多門類上萬種產(chǎn)品,產(chǎn)品涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學的各個領(lǐng)域。同時需要待測服務(wù)可以隨時聯(lián)系銷售陳。。。。。。

 

 

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