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人類(lèi)白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

來(lái)源:上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司   2019年08月20日 08:15  

elisa試劑盒價(jià)格,物美價(jià)廉,量大從優(yōu),部分ELISA試劑盒*銷(xiāo)售。

上海琛藝實(shí)業(yè)有限公司涉足新的生物領(lǐng)域ELISA試劑盒,ELISA試劑盒研發(fā)的種屬涵蓋:人,大鼠,小鼠,豬,牛,羊,兔,植物,農(nóng)殘類(lèi),魚(yú)類(lèi)等。公司常備現(xiàn)貨gibco10270-106胎牛血清,BI胎牛血清04-001-1cas,上百株人的細(xì)胞帶STR鑒定,具有完善的實(shí)驗(yàn)技術(shù)開(kāi)發(fā)平臺(tái),成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng),熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù),結(jié)合公司的研發(fā)團(tuán)隊(duì),可以有效的保證公司產(chǎn)品強(qiáng)的穩(wěn)定性和高的準(zhǔn)確性,同時(shí)又具有競(jìng)爭(zhēng)力的價(jià)格。公司目前主要提供生化試劑、分子生物學(xué)試劑及試劑盒,各種抗體及免疫學(xué)試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材等多門(mén)類(lèi)產(chǎn)品,產(chǎn)品涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。

公司產(chǎn)品進(jìn)入。。。。

中文名稱(chēng):人類(lèi)白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

ELISA試劑盒品牌:琛藝酶科

種屬:人ELISA試劑盒

檢測(cè)波長(zhǎng):450nm

所需樣本體積:50-100ul

ELISA試劑盒適用范圍:僅供科研

庫(kù)存:現(xiàn)貨

保存及有效期:2-8℃,六個(gè)月

檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。

例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦斧液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。

琛藝供應(yīng)的種屬有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELSA試劑盒等

同時(shí)上海琛藝可以代做人、大鼠、小鼠、兔子、豚鼠、豬、雞、犬、猴子、羊、牛等種屬elisa實(shí)驗(yàn)。

ELISA試劑盒參數(shù)規(guī)格

【產(chǎn)品名稱(chēng)】:人類(lèi)白細(xì)胞抗原E(HLA-E)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

【供貨期】:1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))

【產(chǎn)品用途】:被測(cè)樣品定性定量分析

【產(chǎn)品規(guī)格】:96T/48T(兩種規(guī)格)

【檢測(cè)方法】:酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)

【保存條件】:2-8℃

【產(chǎn)品性狀】:液體盒裝

【產(chǎn)品價(jià)格】:(含稅含運(yùn)費(fèi),我們?nèi)烫峁〦LISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè))

【銷(xiāo)售優(yōu)勢(shì)】:價(jià)格行業(yè)優(yōu)勢(shì)、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問(wèn)題包換退

【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等

ELISA試劑盒原理:

elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人CC趨化因子受體2(CCR2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人CC趨化因子受體2(CCR2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

人ELISA試劑盒樣本處理及要求:

1.  血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱(chēng)重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。

4.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

elisa雙抗體夾心法測(cè)抗原

雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原zui常用的方法,操作步驟如下:
1) 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
2) 加受檢標(biāo)本,保溫反應(yīng)。標(biāo)本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
3) 加酶標(biāo)抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢抗原的量相關(guān)。
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過(guò)比色,測(cè)知標(biāo)本中抗原的量。在臨床檢驗(yàn)中,此法適用于檢驗(yàn)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對(duì)受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。如抗體的來(lái)源為抗血清,包被和酶標(biāo)用的抗體分別取自不同種屬的動(dòng)物。如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測(cè)。
在一步法測(cè)定中,當(dāng)標(biāo)本中受檢抗原的含量很高時(shí),過(guò)量抗原分別和固相抗體及酶標(biāo)抗體結(jié)合,而不再形成"夾心復(fù)合物"。類(lèi)同于沉淀反應(yīng)中抗原過(guò)剩的后帶現(xiàn)象,此時(shí)反應(yīng)后顯色的吸光值(位于抗原過(guò)剩帶上)與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(位于抗體過(guò)剩帶上)某一抗原濃度的吸光值相同(參見(jiàn)1.3.2,圖1-4),如按常法測(cè)讀,所得結(jié)果將低于實(shí)際的含量,這種現(xiàn)象被稱(chēng)為鉤狀效應(yīng)(hook effect),因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)到達(dá)高峰后呈鉤狀彎落。鉤狀效應(yīng)嚴(yán)重時(shí),反應(yīng)甚至可不顯色而出現(xiàn)假陰性結(jié)果。因此在使用一步法試劑測(cè)定標(biāo)本中含量可異常增高的物質(zhì)(例如血清中HBsAg、AFP和尿液hCG等)時(shí),應(yīng)注意可測(cè)范圍的zui高值。用高親和力的單克隆抗體制備此類(lèi)試劑可削弱鉤狀效應(yīng)。
假使在被測(cè)分子的不同位點(diǎn)上含有多個(gè)相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇,也可用針對(duì)此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。但在HBsAg的檢測(cè)中應(yīng)注意亞型問(wèn)題,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個(gè)亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性,這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問(wèn)題。
雙抗體夾心法測(cè)抗原的另一注意點(diǎn)是類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)的干擾。RF是一種自身抗體,多為IgM型,能和多種動(dòng)物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗體夾心法檢測(cè)的血清標(biāo)本中如含有RF,它可充當(dāng)抗原成份,同時(shí)與固相抗體和酶標(biāo)抗體結(jié)合,表現(xiàn)出假陽(yáng)性反應(yīng)。采用F(ab')或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,由于去除了Fc段,從而消除RF的干擾。雙抗體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,已被列為這類(lèi)試劑的一項(xiàng)考核指標(biāo)。
雙抗體夾心法適用于測(cè)定二價(jià)或二價(jià)以上的大分子抗原,但不適用于測(cè)定半抗原及小分子單價(jià)抗原,因其不能形成兩位點(diǎn)夾心。

樣品要求

·客戶(hù)需提供待檢測(cè)抗體和包被用抗原。

·檢測(cè)的樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清、人和動(dòng)物的血清、血漿。

·樣本收集后應(yīng)立即-20℃保存,若長(zhǎng)期保存應(yīng)-70℃。

·樣本量的要求:若一個(gè)指標(biāo)做復(fù)孔檢測(cè)應(yīng)不少于250ul,做單孔檢測(cè)應(yīng)不少于120ul。建 議若客戶(hù)樣本量充足提供500ul以上。

·客戶(hù)的樣本收集后,立即按要求保存,切忌反復(fù)凍融。外地客戶(hù)郵寄需要用干冰運(yùn)輸。郵寄前請(qǐng)與溝通確認(rèn)。

什么叫著ELISA試劑盒:

ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。 ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到*科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。 Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。

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