SW480-LUC人結腸癌細胞-熒光素酶標記培養說明簡介：

產品規格：1×10?cells/T25培養瓶

生長特性貼壁

細胞形態上皮細胞樣

細胞背景描述： SK-OV-3細胞是由G·Trempe和L·J·Old于1973年從卵巢腫瘤病人的腹水分離得到。SK-OV-3細胞對腫瘤壞死因子和幾種細胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受。SK-OV-3細胞在裸鼠中致瘤，且形成與卵巢原位癌一致的中度分化的腺癌。

生長培養基McCoy's (貨號:PM150710)＋10% FBS(貨號:164210-500)＋1% P/S(貨號:PB180120)

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種，細胞庫管理規范，提供的細胞株背景清楚，提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上，且不含有 HIV-1、HBV、 HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

規格：>5×100000cells/ml瓶，細胞可以達到15倍增

含量：>1x10⁶  個/mL

運輸和保存：可選擇干冰運輸及發送

細胞用途：僅供科研使用。

細胞冷凍及保存方法如下：

（1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇；

（2）細胞存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。

SW480-LUC人結腸癌細胞-熒光素酶標記培養說明

細胞培養方法如下：

1、將細胞稀釋到1000個細胞/mL，接種到24孔板，每孔1ml。

2、接種后第二天在100ug/mL~1mg/mL的G418濃度范圍內進行篩選。

3、每隔3天跟換1次培養液，保持G418濃度不變。

4、選擇出在10~14天內使細胞全部死亡的低G418濃度來進行下一步的篩選試驗。由于每種細胞對G418的敏感性不同，一般變動在100ug/ml～1000ug/ml范圍。

細胞來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

細胞培養規范及其建議：

1.取出小鼠后瀝干酒精，放入超凈臺內，固定在泡沫板上。

2.用鑷子提起皮膚，用解剖剪剪開皮膚一個橫切口，將皮膚向上撕開，然后剪開肌肉等，暴露出腹腔，在左側找到脾臟，用彎頭眼科鑷取出脾臟，置于無菌培養皿中。

3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次，并剔除多余無用的組織。

4.將篩網置于平皿中，脾臟置于篩網上，用彎頭鑷鑷住，輕輕在篩網上進行碾磨，同時不停滴加不含血清的培養液沖洗。

5.將碾磨好的細胞懸液吸入至離心管中，離心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。

6.加入10ml培養液，吹打混勻，取樣計數。

7.將稀釋好的細胞懸液分裝于培養瓶中，輕輕搖晃混勻，在培養瓶上。

細胞培養的優點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備  

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等； 

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

注意事項

凍存細胞接收后的處理：

1.干冰運輸，收到細胞后立即轉入-80℃冰箱短暫中轉或直接復蘇；
2.收到細胞后，若發現干冰已經*揮發、凍存管瓶蓋破裂脫落,請立即拍照后與我們聯系。

復蘇細胞接收后的處理：

1.收到細胞后，請首先檢查培養瓶是否破損或漏液，培養液是否混濁，如有漏液及培養液混濁情況請立即拍照把圖片發給我們。
2.75%酒精消毒瓶身后放培養箱中靜置4-6h后，在顯微鏡下確認細胞狀態并拍照100倍和200倍的照片，若有貼壁細胞脫落，可收集上清離心，將沉淀用新的培養基接種至新的培養瓶或培養皿中。
3.建議收到當天不要消化處理，如果細胞長滿90%，可選擇傳代處理。
4.如您收到細胞3天內沒有反饋相關問題，出現的細胞問題將不提供免費重發服務。

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