*免疫組化實驗成功的關鍵是抗體，如果抗體不好，整個實驗就基本上不會成功。如何選擇抗體成為免疫組化zui頭疼的問題，因為一旦實驗不成功將浪費我們辛苦收集來的樣本，今天讓上海研域與您分享一下如何選擇抗體這個問題！

1、一抗質量是酶免疫組化、免疫熒光和Western blotting等試驗中的zui關鍵因素之一。1）選擇單克隆還是多克隆抗體，前者特異性好，而后者靈敏度高；2）選擇何種種屬來源？一般兔來源的多是多克隆；而小鼠來源的多是單克隆，但也有另外。這也決定了你的二抗類型。3）檢測何種種屬的抗原，即species reactivity:Hu-human, Ms-mouse, Rat, Goat, Rb-rabbit, Shp-sheep等；這個很重要。4）抗體類型：IgG1/IgG2a/IgM?一旦一抗選為IgM，那么你二抗就必須是IgM；5)應用范圍：WB, IP, IF, IHC(P), ELISA一抗說明書中注明抗體可以應用于western blotting、免疫沉淀、免疫熒光、免疫組化（石蠟切片）、ELISA等等，這根據你實驗目的抉擇。6）抗體公司的選擇，主要根據信價比的高低以及高質量文獻數據支持。

2、二抗選擇：一般有生物素標記、HRP標記和熒光素標記的二抗等多種。一抗種屬選擇好后，那么二抗只能是某種抗一抗種屬來源的抗體，如果是酶免疫組化，則可以選擇Bio-或HRP-標記，可購買二抗染色試劑盒，包括二抗、SP等；而免疫熒光則可以選擇熒光素標記的二抗。zui后，建議大家可能還是在排除方法、切片中抗原有無等前提下來客觀、正確評價各種抗體的質量。

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