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CoC1/DDP人結(jié)腸癌順鉑耐藥細胞 含STR鑒定

來源:上海琛藝實業(yè)有限公司   2019年06月27日 16:20  

上海琛藝實業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司新引進細胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。

CoC1/DDP人結(jié)腸癌順鉑耐藥細胞 含STR鑒定

 

上海琛藝實業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司新引進細胞上千株,其中人的已通過STR鑒定的有幾百株,歡迎各位選購。。。。。。

 

 

 

產(chǎn)品信息

名稱CoC1/DDP人結(jié)腸癌順鉑耐藥細胞 含STR鑒定
別稱COC1/DDP
種屬
組織來源卵巢
生長特性懸浮細胞
細胞形態(tài)淋巴母細胞樣
背景描述COC1/DDP細胞是由陳惠楨教授等用藥物劑量增選法篩選獲得的COC1細胞耐藥亞株。COC1/DDP細胞對順鉑(DDP 1μg/ml)的耐受性是親本株(COC1細胞)的6.5倍;同時,對卡鉑(CBD-CA)、C(MMC)也具有不同程度的交叉耐受性。COC1/DDP細胞可用于卵巢腫瘤治療的體外試驗研究。
生長培養(yǎng)基RPMI-1640(PM150110)+10% FBS(164210-500)+0.5-2μg/ml DDP+1% P/S(PB180120)
推薦傳代比例1:2-1:4
推薦換液頻率2-3次/周
凍存條件凍存液:50%基礎培養(yǎng)基+40%胎牛血清+10%DMSO溫度:液氮
培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃
致瘤性Yes, forms tumors in nude mice.

組成:

組份

數(shù)目

細胞

 1 T-25

細胞說明書

一份

  • CCRF-CEM人急性T淋巴細胞白血病 含STR鑒定簡介:

生長特性:

貼壁生長

 

細胞來源:

ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進

培養(yǎng)條件:

培養(yǎng)基:F12K+0.1mg/ml肝素+1%ECGS +10%FBS(推薦德國SERANA S-FBS-SA-015優(yōu)等胎牛血清)

氣相:空氣95%,二氧化碳5%

溫度:37

培養(yǎng):

  • 貼壁細胞

1.75%酒精噴灑整個瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行2-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代;

2.待細胞長滿瓶底面積80%-90%,需要對其進行傳代,次傳代比例為1:2

3傳代步驟:將0.25%EDTA胰酶置于37°預熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入1mlPBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為zui佳消化時間,記錄zui佳消化時間,以便于下次消化),消化好后加入1ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心3min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細胞,進行傳代。

 

二、懸浮細胞

1.75%酒精噴灑整個瓶消毒,然后置于無菌操作臺,打開瓶口,輕輕吹打后,將其中的細胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中,然后1200rpm離心3min,去上清;

2.將離心好的細胞轉(zhuǎn)移至T-25瓶中,并加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基,然后將其置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液(離心后去舊液,加入新鮮培養(yǎng)基);

3.顯微鏡觀察細胞數(shù)目比較多時,對其進行傳代,次傳代比例為1:2(離心后平均分成兩瓶培養(yǎng))。

 

細胞總數(shù):

1~3*106

傳代周期:

2-3

傳代比例:

1:2~1:4

換液頻率:

2-3

凍存液:

90%FBS+10%DMSO

 

四、注意事項:

收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

瓶中運輸?shù)呐囵B(yǎng)液不能重復使用,請換新鮮培養(yǎng)液培養(yǎng)

對于貼壁細胞,若大部分細胞漂浮,置于培養(yǎng)箱隔夜觀察,大部分漂浮細胞重新貼壁,表明細胞活力正常,繼續(xù)培養(yǎng),剩余漂浮的細胞可以去掉;若大部分細胞仍然不貼壁,將漂浮的細胞離心收集,用臺盼藍染色鑒定細胞活力,并與本公司銷售人員及時聯(lián)系。

建議客戶收到細胞后不同倍鏡各拍幾張細胞的照片,記錄細胞狀態(tài),如細胞狀態(tài)出現(xiàn)問題請于72h內(nèi)與本公司銷售聯(lián)系,以便于更好的幫您解決問題,超過時間我段,本公司則默認細胞狀態(tài)良好,不免費對后續(xù)細胞狀態(tài)問題進行售后。

 

做細胞實驗的同學看過來。

選擇上海琛藝生物細胞有3個理由:

1、細胞狀態(tài)好,形態(tài)佳,易成活,是市面上比較好養(yǎng)的細胞之一;

2、物流迅速,復蘇好后發(fā)貨,次日就能到;

3、使用我司推薦的進口品牌血清進行培養(yǎng)實驗,效果更佳。

 

 

專業(yè)技術(shù)人員萬工收藏的細胞培養(yǎng)小技巧:

1. 買細胞要去靠譜的地方買,比如 ATCC 或者素冉生物。一般上面會有針對細胞的介紹,這樣培養(yǎng)之前可以了解細胞正常生長的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類型等。

2. 不管是買的細胞,還是別人惠贈的細胞,剛拿到手趕緊的做兩件事:檢測是否有支原體污染;迅速擴增凍存,凍存細胞復蘇后第二天*更換一次培養(yǎng)基。

3. 發(fā)現(xiàn)細胞有污染迅速處理掉,特別是當你養(yǎng)了很多種細胞時。細菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn),支原體污染的話,細胞會長的慢,可以買個支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。

4. 不同細胞生長周期不同。有的生長很快,比如說 MDA-MB-231,傳代的時候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢,比如 BT474,傳代是一分二,復蘇起始的時候兩周多才能長滿。這就需要要在培養(yǎng)細胞的過程中多多摸索。

5. 對于嬌弱的細胞,就得細心呵護。胰酶消化不能過久,吹得時候要輕柔,離心時候也要注意轉(zhuǎn)速和時間。每天都要去看一下細胞,肉眼觀察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀察細胞生長狀況。記住,是每天。

 

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