ELISA試劑盒使用技術及其方法
無論做什么都是熟能生巧,ELISA實驗自然也是如此,其中的操作
技術是需要充分的文字了解與反復實踐的。試劑盒使用的技術影響
有多重要?質量可靠的試劑,良好狀態的儀器,排除各種影響因素的
干擾和正確操作是保證ELISA檢測結果準確可靠的必要條件。
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ELISA試劑盒使用技術及其方法如下:
1. 加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。
2. 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
3. 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4. 合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
其次雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:
1、將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。
2、加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。
3、加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
4、加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色,測知標本中抗原的量。
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