金黃色葡萄球顯色培養基尋找一種既能適合細胞生長又避免添加血清的培養基迫在眉睫,無血清培養應運而生。
目的:探索一種適用于C3A細胞生長的無血清培養基,為肝細胞用于臨床治療以及生物人工肝走入臨床奠定基礎。
方法:分別用無血清培養基、*培養基和基礎培養基培養C3A細胞,觀察細胞的生長狀態,繪制細胞生長曲線和活力曲線,全自動生化分析儀測定上清中谷丙轉氨酶漏出量、尿素含量,放射免疫分析法檢測白蛋白分泌量,實時熒光定量PCR檢測基因水平的變化情況。
結果與結論:3種培養基培養的細胞生長良好,無血清培養基組與*培養基組細胞密度在培養周期內,除第7天以外差異無顯著性意義(P0.05)。培養第4~7天,其他兩組明顯高于基礎培養基組(P0.05);無血清培養基尿素合成水平*培養基基礎培養基(P0.05)。Real-time qPCR顯示,無血清培養基組相對于*培養基組僅CK18、CK19和HNF4α基因表達量下降(P0.05)。
說明實驗研制了一種適合于肝細胞(C3A)生長的無血清培養基,與傳統血清培養能達到同樣的效果。
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