費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌轉(zhuǎn)接培養(yǎng)流程
費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌轉(zhuǎn)接不同于細(xì)菌、酵母等,其固體斜面和平板培養(yǎng)物多為菌絲體,用傳統(tǒng)的劃線方法很難將菌絲挑起,并且接種效果差。因此,霉菌固體轉(zhuǎn)接通常采用切塊法。切塊轉(zhuǎn)接需要的工具有:①接種鏟、②接種鋤。
平板傳代培養(yǎng)
1.將接種鏟和接種鋤用酒精棉擦拭干凈,風(fēng)干后在酒精燈外焰前后上下翻轉(zhuǎn)灼燒10s,放置冷卻;
2.打開(kāi)試管,將試管口邊緣灼燒一圈;用冷卻的接種鋤在試管中,相距0.5cm切兩條平行線(與試管垂直);
3.用冷卻的接種鏟在兩條平行線之間,相距0.5cm切兩條平行線(與試管平行),形成0.5×0.5cm2的正方形菌塊;
4.接種鏟直接插入菌塊底部挑起,平放到新的平板(固體瓊脂表面)上;
5.平板正置放入培養(yǎng)箱,如無(wú)特殊要求,培養(yǎng)溫度25-28℃;
注意:切塊要干凈利落,勿重復(fù)切割,使菌絲嚴(yán)重受損,影響轉(zhuǎn)接效果。
液體搖床培養(yǎng)
1.準(zhǔn)備生長(zhǎng)旺盛的新鮮平板培養(yǎng)物一個(gè);
2.根據(jù)上述方法切塊,6-8塊/(裝液100mL/250mL)、3-4塊/(裝液40mL/100mL),置于三角瓶中,用八層紗布封口,搖床培養(yǎng);
3.如無(wú)特殊要求,培養(yǎng)溫度25-28℃;根據(jù)菌球大小需要,調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速,一般轉(zhuǎn)速越大,形成菌球越小,費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌液越渾濁;轉(zhuǎn)速越小,菌球越大,菌液越澄清。
葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78IgG 人單核增多性李斯特菌素O((LLO)
葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94IgG 人單核趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12IgG 人單胺氧化酶(MAO)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1IgG 人大皰性類天皰瘡(BP)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2IgG 人大內(nèi)皮素(Big ET)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3IgG 人大腸菌素(colicin)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4IgG 人大腸癌專一抗原4(CCSA-4)
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5IgG 人大腸癌專一抗原3(CCSA-3)
費(fèi)氏弧菌發(fā)光桿菌
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