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亮發光桿菌的活化原理及步驟

來源:上海一研生物科技有限公司   2018年05月10日 13:31  

亮發光桿菌的活化步驟:配置菌種適宜生長的培養基、將菌種從保藏狀態恢復到室溫狀態、將通過操作將保藏的菌種接種到培養基中培養、挑選培養基茁壯的菌落。

菌種活化就是將菌種保藏中心處于保藏狀態的菌種放入適宜的培養基中培養,逐級擴大培養是為了得到純而壯的培養物,即獲得活力旺盛的、接種數量足夠的培養物。菌種發酵有一般需要2-3代的復壯過程,因為保存時的條件往往和培養時的條件不相同,所以要活化,讓菌種逐漸適應培養環境要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國內常用的菌種保存方法包括:定期移植法、液體石蠟法、沙土管法、真空冷凍干燥法、80℃冰箱凍結法、液氮超低溫凍結法。對于不同的保存方式活化的方式也不同:

1、定期移植法的菌種復蘇較簡單,直接轉接即可;

2、液體石蠟法保存的菌種在復蘇時,挑取少量菌體轉接在適宜的新鮮培養基上,生長繁殖后,再重新轉接一次;

3、沙土管法保存菌種在復蘇時,在無菌條件下打開沙土管,取部分沙土粒于適宜的斜面培養基上,長出菌落后再轉接一次。或取沙土粒于適宜的液體培養基中,增殖培養后再轉接斜面;

4、真空冷凍干燥法保存菌種在復蘇時先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,將安瓿管頂部燒熱,用無菌棉簽沾冷水,在頂部擦一圈,頂部出現裂紋,用挫刀或鑷子頸部輕叩一下,敲下已開裂的安瓿管的頂端,用無菌水或培養液溶解菌塊,使用無菌吸管移入新鮮培養基上,進行適溫培養;

5、-80℃冰箱凍結法保存菌種復蘇時,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當快速搖動。直到內部結冰全部溶解為止,約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進行培養

6、液氮超低溫凍結法保存亮發光桿菌復蘇與-80℃冰箱凍結法保存菌種復蘇相似,從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進行培養。

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