大鼠ELISA試劑盒實驗步驟詳解
1：留意試劑盒保存期，過保存期的試劑不能運用。
2：評價試劑的實用性，試劑的穩(wěn)定與否，對率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應(yīng)進行陰、陽對照及樣品重復(fù)對比實驗，斷定試劑符合要求后方可運用。
3：嚴厲把握顯色時刻，顯色時刻過短，參加停止液反應(yīng)停止后，底物結(jié)合物的量過少，易呈現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時刻后顯色，應(yīng)判為假陽性，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后當即顯色，不行報陽性，這可能是本底顯色的成果。
4：加樣要、快速。如果加樣不，酶生成物的量不能斷定，直接影響顯色成果。顯色的深淺及A值的測定與參加顯色劑和停止液的量有關(guān)，所以加樣應(yīng)穩(wěn)重。要求在必定時刻內(nèi)加樣結(jié)束的實驗，如果加樣緩慢，便呈現(xiàn)差錯，并且試劑長時刻暴露在外，特別室溫過高時，保存期會縮短乃至失效。
5：檢驗技師應(yīng)具有從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能嫻熟操作實驗儀器、器械，具有必定總結(jié)和剖析問題的才干，對實驗中呈現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。
6：運用校對過的微量移液器，掃除自然差錯。移液器與否對定量檢測尤為重要。
7：仔細閱讀說明書，嚴厲依照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不行混用。值得改善的當?shù)兀貜?fù)實驗斷定建立后才干改善。
8：洗刷*，如若洗板不*，酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗刷液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳腐的洗刷液會呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能呈現(xiàn)假陽性。
9：嚴控反應(yīng)時刻，反應(yīng)時刻過長，酶失活；反應(yīng)時刻過短，酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合，生成物結(jié)構(gòu)松懈不結(jié)實，容易洗掉，都可能造成假陰性。
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