PMSF是絲氨酸蛋白酶和乙酰膽堿酯酶抑制劑。它抑制蛋白酶,如糜蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、巰基蛋白酶如凝血酶。PMSF抑制絲氨酸蛋白酶的磺化的絲氨酸殘基的活性部位。
PMSF的配制方法:
溶解174mg的PMSF(苯鉀基磺酰氟)于足量的異丙醇中,定容到10ml,分裝成小份貯存于-20℃,使用時終濃度一般為1mmol/L。
使用介紹:
1)抑制絲氨酸蛋白酶(如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,凝血酶)和巰基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);
2)10mg/ml溶于異丙醇(或無水乙醇)中;
3)在室溫可保存一年,一般保存在-20度或4度.;
4)工作濃度:17~174ug/ml(0.1~1mM),儲存液濃度為100或200mM;
5) 在水液體溶液中不穩定,30分鐘就會降解一半,必須在每一分離和純化步驟中加入新鮮的PMSF,樣品處理超過1h,補加一次。(見水分解,使用前加入);
注意事項:
1.PMSF(苯鉀基磺酰氟)溶解到異丙醇中,不能溶解到水中的。-20℃保存也會有結晶析出,這是正常的,等到溫度稍高混勻就可以了。
2.PMSF嚴重損害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚,吸入、吞進或通過皮膚吸收后有致命危險。一定要注意防護,手套和口罩。
3.一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF,應立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應予丟棄。
4.PMSF在水溶液中不穩定。應在使用前從貯存液中現用現加于裂解緩沖液中。
5.PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時,20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min,這表明將PMSF溶液調節為堿性(pH>8.6)并在室溫放置數小時后,可安全地予以丟棄。
免責聲明
- 凡本網注明“來源:化工儀器網”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網絡有限公司-化工儀器網合法擁有版權或有權使用的作品,未經本網授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經本網授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網”。違反上述聲明者,本網將追究其相關法律責任。
- 本網轉載并注明自其他來源(非化工儀器網)的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時,必須保留本網注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發表之日起一周內與本網聯系,否則視為放棄相關權利。