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人ELISA試劑盒試驗(yàn)原理

來(lái)源:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司   2016年12月02日 14:19  

人ELISA試劑盒人色素上皮衍生因子ELISA試劑盒本試劑僅供研究使用      
標(biāo)本:血清或血漿
試驗(yàn)原理:
PEDF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知PEDF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將PEDF和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中PEDF的濃度呈比例關(guān)系。
操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。
加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線(xiàn)性的,根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)法得到的結(jié)果。
人ELISA試劑盒人色素上皮衍生因子ELISA試劑盒結(jié)果判斷與分析
1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的PEDF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線(xiàn),樣品的PEDF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測(cè)值范圍:0-800ng/ml
4、敏感度: 1.0 ng/ml
碳酸二丙酯    英文名(EN):    Dipropyl carbonate,99%    CAS No.:    623-96-1    規(guī)格(SP):    1G    類(lèi)別(Key):    通用試劑
丙二酸二異丙酯    英文名(EN):    Diisopropyl malonate,99%    CAS No.:    13195-64-7    規(guī)格(SP):    25ML    類(lèi)別(Key):    通用試劑
氰乙酸甲酯    英文名(EN):    Methyl cyanoacetate,99%    CAS No.:    105-34-0    規(guī)格(SP):    100G    類(lèi)別(Key):    通用試劑
肉桂酸芐酯    英文名(EN):    Benzyl cinnamate,≥98%    CAS No.:    103-41-3    規(guī)格(SP):    100G    類(lèi)別(Key):    通用試劑
乙酸異辛酯    英文名(EN):    2-Ethylhexyl acetate,≥99%    CAS No.:    103-09-3    規(guī)格(SP):    500ML    類(lèi)別(Key):    通用試劑
對(duì)苯二甲酸二辛酯    英文名(EN):    Dioctyl terephthalate,≥96%    CAS No.:    6422-86-2    規(guī)格(SP):    500ML    類(lèi)別(Key):    通用試劑
2-氯丙酸甲酯    英文名(EN):    Methyl 2-chloropropionate,97%    CAS No.:    17639-93-9    規(guī)格(SP):    25G    類(lèi)別(Key):    通用試劑
對(duì)羥基苯乙酸甲酯    英文名(EN):    Methyl 4-Hydroxyphenylacetate,99%    CAS No.:    14199-15-6    規(guī)格(SP):    25G    類(lèi)別(Key):    通用試劑
乙酸芳樟酯    英文名(EN):    Linalyl Acetate,≥97%    CAS No.:    115-95-7    規(guī)格(SP):    25G    類(lèi)別(Key):    通用試劑
人ELISA試劑盒

 

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