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生物試劑銷售中心TOM-1細胞培養技術

來源:生物試劑銷售中心   2016年10月12日 12:37  

 購買試劑銷售生物試劑銷售中心TOM-1細胞培養技術注意事項如下:

1 收到細胞后首先觀察T-25瓶是否有損壞、漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們。

2 對于貼壁細胞,若細胞漂?。号囵B瓶不開封,用75%酒精擦拭后平躺置于培養箱內。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉;如細胞還不貼壁,將細胞離心收集移到新的培養瓶中,原培養瓶加部分培養液繼續培養,中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。

3 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和本公司技術部溝通交流。

我們全心全意為您服務,提供產品,保障售后服務,真心把客戶奉為上帝,及時處理客戶訂單,全程跟蹤貨源,采用誠信快遞運輸,認真解答客戶疑問,對客戶售后問題,不拖沓,不推卸責任,認真負責的態度。生物試劑銷售中心TOM-1細胞

第二節 細胞培養基的基本要求

體外培養的細胞直接生活在培養基中,因此培養基應能滿足細胞對營養成分、促生長因子、激素、滲透壓、pH等諸多方面的要求。

一、營養成分 維持細胞生長的營養條件一般包括以下幾個方面:

1、氨基酸:是細胞合成蛋白質的原料。所有細胞都需要12種必須氨基酸:纈氨酸、亮、異亮、蘇、賴、色、苯丙、蛋、組、酪、精氨酸、胱氨酸。此外還需要谷氨酰胺,它在細胞代謝過程中有重要作用,所含的氮是核酸中嘌令和嘧啶合成的來源,同樣也是合成三、二、一磷酸酰苷所需要的基本物質。 體外培養的各種培養基內都含有必需氨基酸。

2、單糖:培養中的細胞可以進行有氧與無氧酵解,六碳糖是主要能源。此外六碳糖也是合成某些氨基酸、脂肪、核酸的原料。細胞對葡萄糖的吸收能力zui高,半乳糖zui低。

體外培養動物細胞時,幾乎所有的培養基或培養液中都以葡萄糖作為必含的能源物質。

3、維生素:主要扮演輔酶、輔基的角色,*。生物素、葉酸、煙酰胺、泛酸、吡哆醇、核黃素、硫胺素、維生素B12都是培養基常有的成分。

4、無機離子與微量元素:細胞生長除需要鈉、鉀、鈣、鎂、氮和磷等基本元素,還需要微量元素,如鐵、鋅、硒、銅、錳、鉬、釩等。

二、促生長因子及激素 已證實:各種激素、生長因子對于維持細胞的功能、保持細胞的狀態(分化或未分化)具有十分重要的作用。有些激素對許多細胞生長有促生長作用,如胰島素,它能促進細胞利用葡萄糖和氨基酸。有些激素對某一類細胞有明顯促進作用,如可促進表皮細胞的生長,泌乳素有促進乳腺上皮細胞生長作用等。

三、滲透壓 細胞必須生活在等滲環境中,大多數培養細胞對滲透壓有一定耐受性。人血漿滲透壓290mOsm/kg, 可視為培養人體細胞的理想滲透壓。鼠細胞滲透壓在320mOsm/kg左右。對于大多數哺乳動物細胞,滲透壓在260-320mOsm/kg的范圍都適宜。

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SUER1019(XR)     COLO 205細胞,腺癌細胞

SUER1020(XR)     COLO 668細胞,小細胞癌細胞

SUER1021(XR)     COLO 684細胞,星形細胞瘤細胞

SUER1022(XR)     COLO 741細胞,

SUER1023(XR)     COLO 775細胞,慢性粒細胞白血病細胞

SUER1024(XR)     COLO 792細胞,

SUER1025(XR)     COLO 829細胞,

SUER1026(XR)     COLO-320細胞,腺癌細胞

SUER1027(XR)     COLO-677細胞,漿細胞骨髓瘤細胞

SUER1028(XR)     COLO-678細胞,腺癌細胞

SUER1161(XR)     HCC-827-GR5細胞,

SUER1162(XR)     HCC-95細胞,

SUER1163(XR)     HCT 116細胞,

SUER1164(XR)     HCT-15細胞,

SUER1165(XR)     HCT-8細胞,生物試劑銷售中心TOM-1細胞培養技術

四、pH 氣體也是細胞生存的必需條件之一,所需氣體豐要是氧和二氧化碳。氧參與三羧酸循環,產生能量供給細胞生長、增殖和合成各種成分。一些細胞在缺氧情況下,借糖酵解也可獲取能量,但多數細胞缺氧不能生存。在開放培養時,一般置細胞于95%空氣加5%二氧化碳的混合氣體環境中培養。二氧化碳既是細胞代謝產物,也是細胞所需成分,它主要與維持培養基的pH有直接關系。動物細胞大多數需要輕微的堿性條件,pH值約在7.2~7.4℃在細胞生長過程中,隨細胞數量的增多和代謝活動的加強,二氧化碳不斷被釋放,培養液變酸,PH值發生變化。由于NaHCO3容易分解為二氧化碳,很不穩定,致使緩沖系統難以地控制。故這一緩沖系統適合密閉培養。HEPES結合碳酸氫鈉使用,可提供更有效的緩沖體系,主要是防止pH值迅速變動,但zui大缺點是在開放培養或觀察時難以維持正常的pH值。造成pH波動主要是代謝產生的CO,在封閉式培養過程中CO2與水結合產生碳酸,培養基pH很快下降。為解決這一問題,合成培養基中使用了NaHCO3-CO2緩沖系統,并采用開放培養,使細胞代謝產生的CO2及時溢出培養瓶,再通過穩定調節溫箱中CO濃度(5%),與培養基中的NaHCO3處于平衡狀態。

五、無毒、無污染 體外生長的細胞對微生物及一些有害有毒物質沒有抵抗能力,因此培養基應達到無化學物質污染、無微生物污染(如細菌、真菌、支原體、病毒等)、無其他對細胞產生損傷作用的生物活性物質污染(如抗體、補體)。對于天然培養基,污染主要來源于取材過程及生物材料本身,應當嚴格選材,嚴格操作。對于合成培養基,污染主要來源于配制過程,配制所用的水,器皿應十分潔凈,配制后應嚴格過濾除菌。

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