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大鼠HAPI,大鼠小膠質細胞系HAPI相關培養

來源:上海慧穎生物科技有限公司   2016年10月12日 11:02  

大鼠HAPI,大鼠小膠質細胞系HAPI相關培養

產品名稱:小膠質細胞HAPI

細胞形態:上皮細胞樣

組織來源:大鼠

傳代情況:P3-P5

存儲條件:90%FBS+10%DMSO

大鼠HAPI,大鼠小膠質細胞系HAPI相關培養

培養條件:IMDM培養基(GIBCO,貨號12200036)80%;胎牛血清,20%

傳代方法:1:2~1:8傳代;每2~3天換液1次。

生長條件:95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度

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細胞描述:細胞體呈細長或橢圓,從胞體發出細長而有分支的突起,表面有許多小棘突。常規染色見核細長或三角形,染色較深。電鏡下小膠質細胞染色深,核扁平或鋸齒狀,胞質內溶酶體較多。小膠質細胞數量少,約占全部膠質細胞的5%。此細胞是定居在腦內的吞噬細胞,在炎癥刺激下,其抗原性增強,形態伸展,功能活躍。小膠質細胞在腦內各部分均有分布,在灰質中的數量比在白質中的多5倍。海馬、嗅葉和基底神經節的小膠質細胞比丘腦和下丘腦的多,而腦干與小腦中zui少。

起源于神經外胚層。 Ling(1981)的實驗證明,小膠質細胞起源于血循環中的單核細胞,后者進入發育中的中樞神經系統后轉變成具有吞噬能力的阿米巴樣小膠質細胞。阿米巴樣小膠質細胞在吞噬中樞神經系統內一些自然退變的殘余物,同時進行繁殖。至中樞神經系統發育完成后,它們變成靜止小膠質細胞。當中樞神經系統損傷時,靜止小膠質細胞被激活成巨噬細胞,與血循環浸入的單核細胞一齊吞噬碎片和退化變性的髓鞘。當損傷*后,它們又恢復為小膠質細胞。在尼氏法與HE染色切片中其形狀常有變異,這主要與其進行運動及吞噬異物有關。

在細胞增長和產物形成過程中,每間隔一段時間,從中取出部分培養物,再用新的培養液補足到原有體積,使反應器內的總體積不變。 這種類型的操作是將細胞接種一定體積的培養基,讓其生長至一定的密度,在細胞生長至zui大密度之前,用新鮮的培養基稀釋培養物,每次稀釋反應器培養體積的1/2~3/4,以維持細胞的指數生長狀態,隨著稀釋率的增加培養體積逐步增加。或者在細胞增長和產物形成過程中,每隔一定時間,定期取出部分培養物,或是條件培養基,或是連同細胞、載體一起取出,然后補加細胞或載體,或是新鮮的培養基繼續進行培養的一種操作模式。剩余的培養物可作為種子,繼續培養,從而可維持反復培養,而無需反應器的清洗、消毒等一系列復雜的操作。在半連續式操作中由于細胞適應了生物反應器的培養環境和相當高的接種量,經過幾次的稀釋、換液培養過程,細胞密度常常會提高

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