NCBI的“electronic PCR(e-PCR)”工具是UniSTS資源庫的一部分,可以用來尋找一段目的dna片段中的STS標記物。UniSTS (http://www.ncbi.nih.gov/genome/sts/)能提供所有有關STS標記物的資料,包括引物序列、產物大小、作圖信息和別名。與之相鏈接的其他NCBI資源如Entrez、LocusLink和MapViewer也同樣提供這些信息。e-PCR通過搜尋具有正確的方向和間距的序列且這個序列能代表用于擴增STSs的PCR引物,來尋找一段DNA序列中潛在的STSs。
先在ncbi主頁上(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)找到e-PCR的主頁,然后在右手欄點擊“Electronic PCR”鏈接。再在e-PCR主頁的上端大的文本框內粘貼上目的基因序列或鍵入登陸號(accession number)。例如某個序列的登錄號是AF288398,結果顯示該序列只包含一個STS:stSG47693(或RH92759),位于此序列的2102和2232核苷之間。
當點擊“marker”下標記物的名稱時,從UniSTS中出現STS的詳細資料。引物的信息、PCR產物大小以及標記物的替代名稱也出現在主頁的上端。在不同的圖譜中,STSs常有不同的名稱。在“Cross-references”欄目下的LocusLink、UniGene和the Genebridge 4中,將顯示這個STS的定位圖。在“mapping information”部分包含能鏈接到NCBI的“MapViewer”瀏覽器。在主頁的下端是“Electronic PCR results”,顯示了其他序列,包括contigs(重疊群)、mRNAs和包含這個STS標記物的ESTs。
為了在所有圖譜中看到STS標記物及其基因組的狀況,則在“Mapping Information”部分的上端點擊鏈接標志“MapViewer”,這個圖譜瀏覽器會出現兩張圖譜。請注意,在這個視窗里,STS stSG47693被稱為RH92759(用粉紅色強調)。99–Genebridge 4 (GM99_GB4,位于左邊)基因圖譜上有46000個STS標記被放射雜交協會定位到GB4雜交面板上。STS圖譜(位于右邊)顯示了如何使用e-PCR將STSs序列放置到基因組序列組裝?;疑€將兩個圖譜的標記物連接起來,而紅色線條顯示STS RH92759在兩張圖譜中的位置。在這個區域,STS圖譜中共有211個STSs,但在這個視窗里只標記了20個。在STS圖譜的右邊,點擊綠色和黃色圓圈會出現STS標記物的圖譜。通過左邊工具條的縮放工具,可以放大或縮小這個視窗。
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