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北京諾博萊德科技有限公司
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當前位置:北京諾博萊德科技有限公司>>生化試劑>>糖酵解系列>> BJ6010葡萄糖-6-磷酸含量測定試劑盒 糖酵解

葡萄糖-6-磷酸含量測定試劑盒 糖酵解

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號BJ6010

品       牌NobleRyder/諾博萊德

廠商性質生產商

所  在  地北京市

更新時間:2025-04-02 14:48:32瀏覽次數:79次

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供貨周期 現貨 規格 100T/96S
貨號 BJ6010 應用領域 環保,化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥
主要用途 是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產物,廣泛存在于動植物體和微生物中
6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱 6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產物,廣泛存在于動植物體和微生物中。
葡萄糖-6-磷酸含量測定試劑盒 糖酵解

葡萄糖-6-磷酸(Glucose 6-phosphate6P G)含量測定試劑盒說明書

微量法 100 管/48

葡萄糖-6-磷酸含量測定試劑盒 糖酵解

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義:

6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱 6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產物,廣泛存在于動植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其第一個底物,該過程也是生成 NADPH 的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉化形成糖原或淀粉而被儲存起來。

測定原理:

6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化 6PG NADP+生成 6 磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH 1-mPMS 的作用下使WST-8 顯橙黃色,在 450 nm 下測定吸光值。

組成:

產品名稱

BJ6010-100T/48S

Storage

提取液:液體

60ml

4℃

試劑一:液體

12ml

4℃

試劑二:粉劑

1  

-20℃

試劑三:液體

1.5ml

4℃避光

說明書

一份

自備儀器和用品:

酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、96 孔板、研缽、冰、蒸餾水。

6PG 提取:

1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104 個):提取液體積(ml)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1ml 提取液),超聲波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次), 8000g,25℃離心 10min,取上清待測。

2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1ml 提取液),進行冰浴勻漿,8000g,25℃離心 10min,取上清待測。

3、血清(漿)等液體樣品:直接測定。

測定步驟:

1、酶標儀預熱 30min 以上,調節波長至 450nm。

2、試劑二的配制:臨用前加入 3ml 水充分溶解待用,用不完的試劑分裝后-20℃保存;

3、工作液的配制:臨用前按照樣本數量,按以下比例配制工作液

試劑名稱(μl)

測定工作液

對照工作液

試劑一

100

100

試劑二

50



50

試劑三

10

10

樣本測定

按下表在 96 孔板中加入如下試劑

試劑名稱(μl)

測定管

對照管

樣本

50

50

測定工作液

150


對照工作液


150

37℃避光孵育 30min,450nm 下測定吸光值 A 測定與A 對照,△A=A 測定-A 對照。每個測定管需設一個對照管。

6PG 含量計算:

1、標準條件下測定回歸方程為 y = 3.8589x - 0.0016,R2 = 0.997; x 為 6PG 含量(μmol/ml),y 為吸光值。

2、按照血清(漿)體積計算

6PG 含量(nmol/ml)= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷V1×1000

=259.1×(△A+0.0016)

3、按照蛋白濃度計算

6PG 含量(nmol/mg prot)= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷(V1×Cpr)×1000

=259.1×(△A+0.0016) ÷Cpr

4、按照樣品質量計算

6PG 含量(nmol/g 鮮重)= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷(W ×V1÷V2)×1000

=259.1×(△A+0.0016) ÷W

3、按照細菌或細胞密度計算

6PG 含量(nmol/104 cell)= [(△A+0.0016)÷3.8589×V1]÷(500×V1÷V2)×1000

=0.518×(△A+0.0016)

V1:加入反應體系中樣本體積,0.05ml;V2:加入提取液體積,1 ml; Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/ml; W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬;1000,μmol 到nmol 的換算系數。


葡萄糖-6-磷酸含量測定試劑盒 糖酵解

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