NobleRyder E9828 內(nèi)毒素清除劑Endotoxin Erasol(for DNA solution)

產(chǎn)品貨號：E9828

產(chǎn)品名稱：內(nèi)毒素清除劑Endotoxin Erasol(for DNA solution)

英文名稱：Endotoxin Erasol(for DNA solution)

產(chǎn)品規(guī)格：20ml/100ml

內(nèi)毒素清除劑 輔助試劑

產(chǎn)品簡介：

儲存條件：RT，有效期1年

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

NobleRyder E9828 內(nèi)毒素清除劑Endotoxin Erasol(for DNA solution)

主要用于清除DNA、蛋白質(zhì)或其他液體樣品中的內(nèi)毒素。在特定的pH值、鹽濃度和溫度條件下，內(nèi)毒素清除劑能與 DNA、重組蛋白以及液體樣品中的內(nèi)毒素特異性結(jié)合，經(jīng)過室溫高速離心后，DNA 或蛋白質(zhì)等保留在水相，而內(nèi)毒素則被濃縮到極小體積的下層相而被清除。經(jīng)過 3次以上重復(fù)抽提后可將活性為5000～50000 EU/mL的內(nèi)毒素水平降低到5～0.5 EU/mL以下，即降低1000～10000 倍。

操作步驟：

1. 提取前請將內(nèi)毒素清除劑放在冰上冰浴5min，期間翻轉(zhuǎn)瓶子數(shù)次使試劑均勻預(yù)冷。

(1) 已純化的質(zhì)粒DNA內(nèi)毒素清除：吸取500μL DNA溶液于微型離心管，加入1/10體積3M NaAc pH5.2 或1/20體積5M NaCl溶液，冰浴5min。

(2) 在提取質(zhì)粒 DNA 過程中清除內(nèi)毒素：以堿裂解法提取質(zhì)粒為例，在加入裂解液和中和液并離心去除碎片之后，吸取含質(zhì)粒DNA的上清于新離心管中，冰浴5min。

2. 加入1/5體積預(yù)冷的內(nèi)毒素清除劑，振蕩混勻，溶液變渾濁。

3. 冰浴5min，溶液應(yīng)變清亮。

4. 37℃水浴5min，不時振蕩，溶液又變渾濁。

5. 12000rpm 室溫離心5min，溶液應(yīng)分為兩相，上層水相含DNA，下層油狀相含內(nèi)毒素。

6. 將含DNA的上層水相轉(zhuǎn)移到新管，棄油狀相，重復(fù)抽提三次，即重復(fù)步驟2-6三次。

7. 加入2.5 體積無水乙醇，-20℃沉淀30min或過夜；12000rpm離心10min，棄上清；加入70％乙醇洗滌沉淀，12000rpm離心5min棄上清；空氣干燥沉淀，加入100～200μL無內(nèi)毒素的高純水或TE溶解沉淀。

8. 用內(nèi)毒素檢測試劑測定樣品中內(nèi)毒素活性，并與初始樣品比較。

 注意事項：

1. DNA濃度>1mg/mL時清除內(nèi)毒素效率降低。由于DNA和蛋白質(zhì)本身的性質(zhì)，清除程序可導(dǎo)致10-20％的DNA丟失，所幸的是與清除內(nèi)毒素的艱難相比DNA更容易提取制備。

2. 所有溶液應(yīng)用無內(nèi)毒素的高純水配制，所有器械材料均應(yīng)不含內(nèi)毒素，玻璃器皿可高溫烘烤，非揮發(fā)性水溶液可高壓120℃高溫處理。

內(nèi)毒素清除劑 輔助試劑

產(chǎn)品訂購信息：

E9828  內(nèi)毒素清除劑Endotoxin Erasol(for DNA solution)  20ml/100ml