土壤β-木糖苷酶（Solid-β- xylosidase, S-β-XYS）測定試劑盒說明書
微量法 100T/48S
正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、細菌和真菌等生物體，是催化木聚糖類半纖維素降解的關鍵酶，產物木糖可作為碳源應用于微生物發酵。另外，β-木糖苷酶還可以作為生物漂白劑應用于造紙工業，比傳統的漂白法環保，具有廣泛的應用價值。
測定原理：
S-β-XYS 催化對硝基苯酚-β-D-木糖苷產生對硝基苯酚，對硝基苯酚在 405nm 處有特征吸收峰，測定405nm 光吸收增加速率，可計算S-β-XYS 活性。
組成：
產品名稱 | BO6095-100T/48S | Storage |
提取液：液體 | 100ml | 4℃ |
試劑一：液體 | 1ml | 4℃避光 |
試劑二：液體 | 10ml | 4℃ |
試劑三：液體 | 10ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
自備儀器和用品：
天平、低溫離心機、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾水。
粗酶液提取：
約 0.1g 鮮土或風干土樣，加入 1ml 提取液進行冰浴勻漿，室溫振蕩提取 30min，然后 10000g，4℃，離心 10min，取上清待測。
測定操作表：
1、分光光度計/酶標儀預熱 30min，調節波長至 405nm。
2、操作表
| 試劑一（μl） |
| 10 |
|
試劑二（μl） | 80 | 70 |
混勻，45℃水浴 20min |
試劑三（μl） | 80 | 80 |
混勻，靜置 5min，405nm 處測定吸光值A，計算ΔA=A 測定管-A 對照管。每個測定管 設一個對照管。 |
β-木糖苷酶活性計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y=13.226x+0.0011，R2=0.9998；x 為標準品濃度（μmol/ml），y 為吸光值ΔA。酶活定義：每克土樣每天催化產生 1μmol 對硝基苯酚的酶量為一個酶活單位。
β-木糖苷酶活性（μmol/d /g 土樣）=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V 樣總：加入提取液體積，1ml； V 反總：反應總體積，0.12ml；V 樣：反應中樣品體積，0.04ml； W：樣品質量，g；T：反應時間，20min=1/72d；
b. 用 96 孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y=6.613x+0.0011，R2=0.9998；x 為標準品濃度（μmol/ml），y 為吸光值ΔA酶活定義：每克土樣每天催化產生 1μmol 對硝基苯酚的酶量為一個酶活單位。
β-木糖苷酶活性（μmol/d /g 土樣）=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V 反總÷(V 樣÷V 樣總×W)÷T
=32.66×(ΔA-0.0011)÷W
V 樣總：加入提取液體積，1ml； V 反總：反應總體積，0.12ml；V 樣：反應中樣品體積，0.04ml； W：樣品質量，g；T：反應時間，20min=1/72d；
ΔA 控制在 0.01-1 范圍內，若ΔA 大于 1，可適當減小樣本量。標準曲線線性范圍為：0.01μmol/ml-0.5μmol/ml。
