采用艾德曼降解法的N端測序：優勢、局限與改進措施檢測技術服務詳情介紹

Nduāncèxù是dànbáizhì組學研究的技術之一，其中艾德曼降解法（Edman Degradation）長期以來被認為是測定蛋白或多肽N端序列的經典方法。該方法基于苯硫酰異氰酸酯（PITC）對N端氨基酸的選擇性標記，并通過逐步降解實現氨基酸序列的解析。盡管近年來基于質譜的測序技術迅速發展，但艾德曼降解法仍在某些特定情況下具有優勢，并且通過改進策略可以進一步提升其適用性。

一、艾德曼降解法的Nduāncèxù的優勢

1、序列解析的直接性

艾德曼降解法可直接從N端順序解析氨基酸殘基，無需依賴數據庫匹配。這對于研究未知蛋白或非模式生物的dànbáizhì序列尤其有價值。

2、氨基酸定量能力

該方法能夠jīngquè測定N端氨基酸殘基的含量，使其在dànbáizhì修飾（如乙?；?、甲?；┗蛲吹鞍阻b定中具有應用。

3、適用于小分子量蛋白和多肽

艾德曼降解法特別適用于測定小于50個氨基酸的小分子蛋白或肽段，在抗體表位映射、短肽鑒定等領域仍被廣泛應用。

4、避免質譜數據復雜性

質譜分析常會因離子碎裂模式、翻譯后修飾及樣本復雜度帶來數據解讀的挑戰，而艾德曼降解法能夠直接讀取N端氨基酸序列，減少數據分析難度。

二、艾德曼降解法的Nduāncèxù的局限性

1、對N端封閉蛋白無效

許多蛋白在翻譯后會經歷N端修飾（如乙?；?、甲酰化或蛋白酶加工），導致艾德曼降解無法識別被修飾的N端殘基。

2、測序長度有限

由于循環降解過程中氨基酸逐步釋放，每個降解周期都會帶來損耗，使得艾德曼降解法通常只能解析10-50個氨基酸長度的序列，難以處理長肽或完整蛋白。

3、對蛋白量要求高

艾德曼降解法對起始蛋白樣本量有較高需求，通常需要pmol級別的蛋白，限制了其在超低豐度蛋白中的應用。

4、時間和成本較高

相較于高通量質譜技術，艾德曼降解法需要較長時間完成循環降解，同時試劑成本較高，限制了其大規模應用。

三、改進措施與優化策略

1、前處理優化以減少N端封閉影響

針對N端修飾問題，可采用化學或酶促方法解除N端封閉。例如，堿性水解可部分去除N端乙?；褂脃ídànbáiméi或AspN等酶特異性剪切蛋白，則可在非N端位置形成新N端，從而提高Nduāncèxù成功率。

2、微量樣品的增強策略

通過改進熒光或放射性標記技術，提高檢測靈敏度，使得納摩爾甚至飛摩爾級別的樣本亦可用于艾德曼降解分析。此外，高效樣品固定基質（如PVDF膜）有助于減少樣品損耗，提高測序成功率。

3、結合質譜技術提高解析能力

艾德曼降解法與質譜聯用（如Edman-MS）可以結合兩者的優勢進行Nduāncèxù，前者用于解析N端序列，后者用于完整蛋白序列的覆蓋補充。例如，先通過艾德曼降解獲得N端部分序列，再利用質譜進行深度解析，從而提高蛋白鑒定的準確性。

4、自動化與高通量化發展

近年來，自動化艾德曼降解系統（如Procise或 PPSQ 系列）已提高了該方法的效率和可重復性。此外，通過微流控技術優化反應體系，可進一步縮短反應時間，并減少試劑消耗，為高通量蛋白組學研究提供新思路。

艾德曼降解法作為傳統的Nduāncèxù方法，在特定研究場景下仍具有bùkětìdài的優勢。盡管其局限性較為明顯，但通過優化樣品前處理、增強微量檢測能力、結合質譜技術及實現自動化改進，該方法仍能在現代dànbáizhì組學研究中發揮作用。百泰派克生物科技提供優質的基于Edman降解的蛋白N端序列分析服務，歡迎聯系我們！

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術優良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題?？稍趩渭毎麑用嫔蠈Χ喾N指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

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