當前位置:> 供求商機> 植物茉莉酸(JA)ELISA試劑盒 酶標儀檢測
檢測原理:試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被茉莉酸(JA)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的茉莉酸(JA)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
樣品收集、處理及保存方法:
1. 樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。
2. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行。
3. 植物萃取液或其它相關樣本:請1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測。
4. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
植物茉莉酸(JA)ELISA試劑盒 酶標儀檢測組成及其配置:(標準品濃度依次為:0、250、500、1000、2000、4000 pg/mL)
名稱(Name) | 96孔配置 | 48孔配置 | 保存條件 |
微孔酶標板(Microelisa stripplate) | 12孔×8條 | 12孔×4條 | 2-8℃ |
標準品(Standard) | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 2-8℃ |
稀釋液(Sample Diluent) | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
檢測抗體-HRP(HRP-Conjugate reagent) | 10mL | 5mL | 2-8℃ |
20×洗滌緩沖液(20X Wash solution) | 25mL | 15mL | 按說明書進行稀釋 |
底物A(Chromogen Solution A) | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
底物B(Chromogen Solution B) | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
終止液(Stop Solution) | 6mL | 3mL | 2-8℃ |
封板膜(Closure plate membrane) | 2張 | 2張 | 2-8℃ |
說明書(User manual) | 1份 | 1份 | 2-8℃ |
自封袋(Sealed bags) | 1個 | 1個 | 2-8℃ |
加樣注意事項:
1. 加樣前:溶液應充分混勻。加樣時避免90度向孔中滴加液體,否則會導致液體殘留再吸頭上,從而導致加樣不準確。正確的加樣方法應為45度,吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。
2. 加樣時:避免速度過快,否則無法保證微量加樣的準確性和均一性;避免液體濺出;
3. 加樣品時:單孔用量要求:≥50微升/指標,如需要做2個復孔則血量≥100微升/指標。
4. 每次加樣順序一致,尤其底物、終止液順序一致,保證每個孔顯色時間相同。
5. 如果移液槍漏氣以至于加樣的量不夠,不能用槍吸出再加,做相應記錄實驗。
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