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細胞中液泡系活體染色

時間:2023/1/12閱讀:2345
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簡介

細胞中液泡系活體染色實驗是利用中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑的特性,在細胞處于生活狀態時,只將液泡系染成紅色,細胞質和細胞核不被染色。

原理

細胞中液泡系活體染色實驗的基本原理是動物細胞內由單層膜包裹的小泡都屬于液泡系,包括高爾基復合體、溶酶體、內質網、轉運泡、吞噬泡等。軟骨細胞內含有較多的粗面內質網和發達的高爾基復合體,能合成與分泌軟骨黏蛋白及膠原纖維等,因而液泡系發達。中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑,在細胞處于生活狀態時,只將液泡系染成紅色,細胞質和細胞核不被染色。

材料與儀器

器材:
解剖器材、蠟盤、載玻片、蓋片、吸管、吸水濾紙、普通光學顯微鏡、蟾蜍。
試劑:

① 1/3000 中性紅;

② 0.65% Ringer 液(兩棲動物用)(氯化鈉,0.65 g;氯-化-鉀,0.042 g;氯化鈣,0.025 g;蒸餾水,100 ml。)

步驟

細胞中液泡系活體染色實驗的基本過程可分為如下幾步:
A 取蟾蜍 1 只,搗毀脊髓法處死,將其腹面朝上固定于蠟盤上,剪開腹腔,取胸骨劍突軟骨最薄部分的一小片,置于載片上。
B 滴加 1/3000 中性紅,染色 15 min。
C 濾紙吸去染液。
D 滴加 0.65% Ringer 液,蓋上蓋片,用濾紙從蓋片側面吸取多余液體。
E 鏡下觀察。

注意事項

1 為便于觀察,在取胸骨劍突時,盡量取較薄部位。

2 本實驗因是活體染色,在實驗的整個過程中,應注意保持標本的活體狀態,特別在取材時應做到準確、快速。


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