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細(xì)胞復(fù)蘇

時間:2023/1/11閱讀:1232
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簡介

細(xì)胞復(fù)蘇是將凍存在液氮中的細(xì)胞解凍之后重新培養(yǎng),細(xì)胞恢復(fù)生長的過程。

材料與儀器

器材:37℃ 水浴箱、離心機(jī)、無菌試管以及培養(yǎng)瓶。
 
試劑:
 
① 含 20% 血清 RPMI 1640 培養(yǎng)液;

 

步驟

細(xì)胞復(fù)蘇的基本過程可分為如下幾步:
 
A 從液氮中取出細(xì)胞安瓿或凍存管,置 37℃ 水浴中迅速融化,一旦冰塊消失即將凍存管從水浴中取出。
 
B 用 70% 乙醇擦洗凍存管外部以減少污染機(jī)會。
 
C 吸取凍存管內(nèi)容物緩慢加入含 4-5 ml 培養(yǎng)液的 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,置 5%CO2、37℃ 細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng),次日換液。也可通過離心去除細(xì)胞保護(hù)劑,再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

 

注意事項

凍存細(xì)胞并非能達(dá)到 100% 復(fù)蘇成功。復(fù)蘇失敗可能與以下因素有關(guān),凍存時細(xì)胞數(shù)量少或生長狀態(tài)不良;細(xì)胞受細(xì)菌或支原體污染;液氮罐保管不善;復(fù)蘇時培養(yǎng)條件改變,如將胎牛血清換成小牛血清;復(fù)蘇方法不得當(dāng)?shù)取?/p>


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安培生物科技有限公司介紹:

安培生物堅持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。


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