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深圳市安培生物科技有限公司
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Calcein釋放實驗檢測細胞毒性T淋巴細胞活性實驗方法

時間:2021/11/12閱讀:1794
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實驗步驟


1. 靶細胞的標記 
用5μmol/L Calcein AM 37℃ 水浴30min進行標記。
 
2. 效-靶細胞作用 
殺傷實驗在圓底96孔培養板中進行。按E/T比例:50/1、25/1、12.5/1、6.25/1、3.13/1、1.56/1加入梯度稀釋的效應細胞與標記好的靶細胞各l00μl/孔,每個比例3復孔。同時設自發釋放組3復孔,*釋放組3復孔。效-靶細胞作用96孔培養板在37℃ 5% CO2培養箱孵育4h后,3000r/min離心5min,將上清移入新的孔中。
 
3. 熒光檢測 
用熒光測量儀檢測上清的熒光值(FI),激發光為485nm,發射光為538nm。
 
4. 結果計算
殺傷率(%)=■×100%



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