成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

深圳市安培生物科技有限公司
中級會員 | 第5年

19126518388

血清系列
細(xì)胞轉(zhuǎn)染
支原體清除
細(xì)胞凍存
實驗耗材
分子試劑
細(xì)胞增殖與凋亡
Biozellen系列
培養(yǎng)基
ELISA試劑盒
TOYOBO(東洋紡)
ZYMO RESEARCH
Greiner(格瑞納)
IKA(艾卡)
化學(xué)發(fā)光底物(ECL)
PROSPEC系列
Epigentek系列
微生物檢測
細(xì)胞生物學(xué)
Corning康寧
解離試劑
細(xì)胞類-實驗耗材
原代細(xì)胞
植物檢測系列試劑盒
SERANA
BSA
細(xì)胞系
生化試劑盒
環(huán)境檢測系列試劑盒(AKEN)
類器官培養(yǎng)
緩沖器和解決方案
生物三凝膠基質(zhì)
細(xì)胞因子分子
生物樣本庫
蛋白研究系列
修飾檢測試劑盒

高效率轉(zhuǎn)染人淋巴瘤細(xì)胞的操作方法

時間:2021/11/11閱讀:1462
分享:

轉(zhuǎn)染條件:

培養(yǎng)板:6孔板

轉(zhuǎn)染試劑用量:10ul

核酸用量:電訊

轉(zhuǎn)染試劑:AD600150,Zeta Life Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑

轉(zhuǎn)染時間:48小時

血清:Z7180FBS-500超低內(nèi)毒素胎牛血清

細(xì)胞凍存:CE70100T無血清細(xì)胞凍存液

高效率轉(zhuǎn)染效果圖如下:

高效率轉(zhuǎn)染人淋巴瘤細(xì)胞的操作方法

高效率轉(zhuǎn)染人淋巴瘤細(xì)胞的操作方法

操作步驟

提前 1 天接種細(xì)胞:細(xì)胞匯合度在 60-80%左右,再進(jìn)行轉(zhuǎn)染。

核酸復(fù)合物制備:將核酸與轉(zhuǎn)染試劑按照 1:1 關(guān)系直接混合,用移液器吹吸 10-15 次混勻,室溫靜 止 10-15 分鐘。

在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入核酸復(fù)合物:根據(jù)參考用量在細(xì)胞中加入核酸復(fù)合物,并輕輕混勻;細(xì)胞培養(yǎng)基 里面可以含有血清。

細(xì)胞換液:轉(zhuǎn)染 24 小時后對細(xì)胞進(jìn)行正常換液,懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程中不用換液。

分析結(jié)果:質(zhì)粒 DNA 轉(zhuǎn)染 48-72 小時后熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-96 小時檢測 mRNA 或蛋白表達(dá)。若進(jìn)行穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株的篩選,則在轉(zhuǎn)染后 24-48 小時左右加入適量的藥物進(jìn)行篩選。siRNA 轉(zhuǎn)染后 9 小時熒光檢測轉(zhuǎn)染效率,48-72 小時檢測 mRNA 或蛋白表達(dá)。

 

注意事項:

1、質(zhì)粒 DNA 必須溶解于無菌雙蒸水或超純水,但不能溶解于提取試劑盒提供的 Buffer。溶解于 Buffer 的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率會下降 80%左右,甚至?xí)D(zhuǎn)染失敗。

2、質(zhì)粒必須去除內(nèi)毒素,內(nèi)毒素對細(xì)胞將產(chǎn)生很大的細(xì)胞毒性,會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率下降 70%-80%左 右,甚至導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失敗(推薦使用 Qiagen、TIANGEN、Omega 去內(nèi)毒素質(zhì)粒提取試劑盒)。 

3、復(fù)合物的制備過程中是絕對不能用其他任何試劑對核酸或轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行稀釋,只需將核酸和轉(zhuǎn)染 試劑兩者按 1:1 比例直接混合,如果進(jìn)行了稀釋會導(dǎo)致轉(zhuǎn)染失。 

4、轉(zhuǎn)染試劑與核酸混勻后用移液器吹打 10-15 次,室溫孵育 10-15 分鐘后即可加入細(xì)胞培養(yǎng)板。 

5、轉(zhuǎn)染 24 小時后進(jìn)行正常換液,不能像 Lipo2000 一樣轉(zhuǎn)染 4-6 小時后換液。 

6、原代細(xì)胞、免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染時,細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基里面不能含有雙抗培養(yǎng)基。


會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標(biāo)簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復(fù)您~
撥打電話
在線留言
主站蜘蛛池模板: 欧美区 亚洲区| 日本三级欧美三级中文字幕| 97碰碰碰免费公开在线视频| 内射无码专区久久亚洲| 亚州欧美综合网| 亚洲天堂男人的av天堂| 日本av在线观看| 国产亚洲欧美一区久久久在| 日韩精品A片一区二区三区妖精| 熟女乱中文字幕熟女熟妇| 一捏胸一边亲一边摸下面| 乱码午夜-极品国产内射| a久久久久一级毛片护士免费| 国产亚洲精品久久无亚洲| 亚洲精品日韩精品欧美精品| 色一情一乱一乱一区99AV| 国产精品对白刺激久久久| 五月天婷婷在线亚洲综合一页| 日本理论片韩国理论片免费看| 精品国产久线观看视频| 亚洲AV国产喂奶在线观看| 被老师肉到失禁H| 欧美一级片老熟女| 开心色提供国产午夜| 久久久久久久久av熟女| 亚洲欧美日韩综合久久久| 日本黄色三级91| 美女裸身大乳图片大全| 精品中文字幕国产亚洲| 国产精品久久国产三级国| 国产精品嘘嘘麻豆久久| 国产精品看高国产精品不卡| 国产亚洲精品久久精品录音| 国产亚洲成AV人片在线观黄桃| 国产精品扒开腿做爽爽爽A片软件| 久久日韩精品无码一区| 麻豆国产精品一区| 久久精品国产久精久精| 很h的短篇小说| 国产精品亚洲欧美在线| 国产无遮挡A片无码免费|