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S-180-LUC小鼠肉瘤
  • S-180-LUC小鼠肉瘤
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更新時間:2025-05-15 11:40:08

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產品名稱:S-180-LUC小鼠肉瘤細胞-熒光素酶標記、S-180-LUC小鼠肉瘤細胞-熒光素酶標記、S-180-LUC小鼠肉瘤細胞-熒光素酶標記、S-180-LUC小鼠肉瘤細胞-熒光素酶標記;常溫細胞收貨當天處理方式1.收到常溫細胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現象
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常溫細胞收貨當天處理方
1.收到常溫細胞后,及時拍照記錄有無漏液/瓶身破損現象
2.鏡下觀察有無微生物污染現象,拍照記錄不同倍數鏡下細胞狀態和有無染菌 ,方便后續售后處理。
3.用75%酒精擦拭瓶身,置于培養箱中靜置培養 2~4h 后進行傳代操作。
4.觀察細胞密度若超過80%則可正常傳代處理(有的原代細胞不可傳代,請根據實 況決定),傳代推薦比例1:2到1:3(按實際收貨細胞密度決定,若確定可聯系技術支持);若細胞密度不到80%則可取出部分培養基留6ml瓶培養 基繼續培養,注意擰松瓶蓋或更換透氣瓶蓋;懸浮細胞注意離心所有培養基以收集細胞。
5. 由于氣溫,運輸等影響造成貼壁細胞漂浮的,請將細胞離心收集后在離心管中 消化后進行傳代 ,或及時聯系技術支持進行指導傳代。
6.若觀察到異常或者對細胞有疑問,請及時跟代理商或者我們聯系;對于細胞 操作及培養注意事項有疑問的,可跟我們的技術支持交流。
附:收到貼壁細胞漂浮處理方法 (部分細胞由于貼壁松散,會出現運輸后漂浮,冬溫低時也會出現細胞收縮漂浮,屬于不可避免因素,正確處理后都可以正常生長)
1、培養瓶內所有培養基轉入無菌離心管,離心收集細胞 (1200rpm 3min) 去除 舊培養基;
2、用 PBS 重懸細胞,將所有細胞收集到一個離心管中,再次離心 (1200rpm 3min) 去 除 PBS
3、入1ml左右0.25%重懸細胞,混勻即可,不能吹打太多次,放入培養 箱消化 細胞,根據細胞特性決定消化時間 (TM3、TM4、293 系列約 1~2 分);
4、消化好后,用移液槍輕輕吹打細胞懸液,使細胞團分散,迅速加入 3-5ml 血清培 養基混勻以終止消化,離心 (1200rpm 3min) 去除;
5、加入 5ml 左右的細胞相應的培養基混勻,按比例接入無菌培養瓶/皿中
6、顯微鏡下觀察看細胞是否成均勻分散的單顆細胞,若有 3-5 個成團的小細 不用 重新消化,使之貼壁后待細胞生長穩定后再消散細胞。
細胞傳代
1. 從培養容器中吸出用過的細胞培養基并丟棄;
2. 用不含鈣、鎂的沖洗細胞 (每10cm2培養表面積約2mL液);從與壁細胞層相對的容器一側輕輕加入沖洗液,以避免攪動細胞 層,前后搖晃容器數次 (注:沖洗步驟可去除可能抑制解離劑作用的少 清、鈣和鎂) ;
3. 從培養容器中吸出沖洗液并丟棄,向培養瓶中加入預熱的解離劑;試應足以覆蓋細胞層(每10cm2大約0.5mL);
4. 輕輕搖晃容器,使試劑覆蓋細胞層;吸出多余解離試劑,T25 細胞
培養瓶留 200ul 左右即可;
5. 將培養容器在室溫下孵育約 2分鐘 ( 請注意實際孵育時間根據所用細胞
系不同而有所差異)
6. 在顯微鏡下觀察細胞解離情況;如果解離程度未達 90%,可將孵育時 長幾分鐘, 30 秒鐘檢查一次解離情況;也可輕輕拍打培養容器以 快細胞解離;
7. 細胞解離程度大于等于 90%時,傾斜培養容器,使細胞上液體盡快流 盡;入所用解離劑兩倍體積的預熱生長培養基;吹打細胞層表面 次,使培養基分散;
8. 將細胞轉移到15mL 無菌離心管中, 200×g 的離心力離心 3-5
(請注意離心速度和時間依細胞種類不同而有所差異)
9. 用最少體積的預熱生長培養基重新懸浮細胞沉淀,將細胞懸液按照 推薦比例稀釋,并將適量體積的細胞懸液轉移到新的細胞培養容器中,把
放回培養箱 (注:如果使用培養瓶,將其放入培養箱前應將瓶蓋 旋松以便進行充分的氣體交換,除非您使用的是通氣式培養瓶和透氣 瓶蓋) 。

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