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產品名稱：LO-2人正常肝細胞、LO-2人正常肝細胞、LO-2人正常肝細胞、LO-2人正常肝細胞細胞介紹 L-02細胞建系鑒定于1980年。該細胞是一株正常肝細胞系，具有典型的肝細胞形態學特征，可用于多種實驗研究。 細胞特性 1）來源：肝臟 2）形態：上皮細胞樣，貼壁生長 3）含量：>1x10 6 個/mL 4）污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性 5）規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式 （1）干冰運輸，收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇； （2）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。 細胞用途 ：僅供科研使用。 細胞培養步驟 一．培養基及培養凍存條件準備： 1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091)；北美胎牛血清，20%；雙抗1%。 2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。 3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。 二．細胞處理： 1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法： 1.棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。 3.按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。 4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。 下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X10 6 個細胞凍存。 3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。


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