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上海富雨生物科技有限公司
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HT-29-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞

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產(chǎn)品名稱:HT-29-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記、HT-29-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記、HT-29-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記、HT-29-GFP人結(jié)腸癌細(xì)胞-綠色標(biāo)記;

常溫細(xì)胞收貨當(dāng)天處理方式
1.收到常溫細(xì)胞后,及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2.鏡下觀察有無(wú)微生物污染現(xiàn)象,拍照記錄不同倍數(shù)鏡下細(xì)胞狀態(tài)和有無(wú)染菌現(xiàn)象,方便后續(xù)售后處理。
3.用 75%酒精擦拭瓶身,置于培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng) 2~4h 后進(jìn)行傳代操作。
4.觀察細(xì)胞密度若超過(guò) 80%則可正常傳代處理(有的原代細(xì)胞不可傳代,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況決定),傳代推薦比例 1:2 到 1:3(按實(shí)際收貨細(xì)胞密度決定,若不確定可聯(lián)系技術(shù)支持);若細(xì)胞密度不到 80%則可取出部分培養(yǎng)基留 6ml 左右原瓶培養(yǎng) 基繼續(xù)培養(yǎng),注意擰松瓶蓋或更換透氣瓶蓋;懸浮細(xì)胞注意離心所有培養(yǎng)基以收集細(xì)胞。
5.由于氣溫,運(yùn)輸?shù)扔绊懺斐少N壁細(xì)胞漂浮的,請(qǐng)將細(xì)胞離心收集后在離心管中消化后進(jìn)行傳代(參考附件),或及時(shí)聯(lián)系技術(shù)支持進(jìn)行指導(dǎo)傳代。
6.若觀察到異常或者對(duì)細(xì)胞有疑問(wèn),請(qǐng)及時(shí)跟代理商或者我們聯(lián)系;對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操 作及培養(yǎng)注意事項(xiàng)有疑問(wèn)的,可跟我們的技術(shù)支持交流。
附:收到貼壁細(xì)胞漂浮處理方法(部分細(xì)胞由于貼壁松散,會(huì)出現(xiàn)運(yùn)輸后漂浮,冬天氣溫低時(shí)也會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞收縮漂浮,屬于不可避免因素,正確處理后都可以正常生長(zhǎng))
1、將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)所有培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入無(wú)菌離心管,離心收集細(xì)胞(1200rpm 3min)去除 舊培養(yǎng)基;
2、用 PBS 重懸細(xì)胞,將所有細(xì)胞收集到一個(gè)離心管中,再次離心(1200rpm 3min)去除 PBS;
3、加入 1ml 左右 0.25%重懸細(xì)胞,混勻即可,不能吹打太多次,放入培養(yǎng)箱消化細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞特性決定消化時(shí)間(TM3、TM4、293 系列約 1~2 分 鐘);
4、消化好后,用移液槍輕輕吹打細(xì)胞懸液,使細(xì)胞團(tuán)分散,迅速加入 3-5ml 含 血清的培 養(yǎng)基混勻以終止消化,離心(1200rpm 3min)去除;
5、加入 5ml 左右的細(xì)胞相應(yīng)的培養(yǎng)基混勻,按比例接入無(wú)菌培養(yǎng)瓶/皿中;
6、顯微鏡下觀察看細(xì)胞是否成均勻分散的單顆細(xì)胞,若有 3-5 個(gè)成團(tuán)的小細(xì)胞團(tuán)可不用重新消化,使之貼壁后待細(xì)胞生長(zhǎng)穩(wěn)定后再消散細(xì)胞。

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