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ATR5大鼠主動脈平滑肌細胞、

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更新時間:2025-04-24 11:24:13瀏覽次數:63次

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產品名稱:ATR5大鼠主動脈平滑肌細胞、ATR5大鼠主動脈平滑肌細胞、ATR5大鼠主動脈平滑肌細胞、ATR5大鼠主動脈平滑肌細胞
產品名稱:ATR5大鼠主動脈平滑肌細胞、ATR5大鼠主動脈平滑肌細胞、ATR5大鼠主動脈平滑肌細胞、ATR5大鼠主動脈平滑肌細胞;細胞特性 1) 來源:主動脈平滑肌 2) 形態:上皮細胞樣,貼壁生長 3) 含量:>1x106 個/mL 4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性 5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 運輸和保存 可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式 (1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇; (2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。 (3)收到細胞后請拍照,3天內如果發現污染,請及時拍照與我們聯系。 細胞用途: 僅供科研使用。 細胞接收后的處理: 1) 收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。 2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。 3) 棄去T25瓶中的培養基,添加6ml新的培養基。 4) 如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代。 5) 接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。 細胞培養步驟 一.培養基及培養凍存條件準備: 1) 準備D/F12培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。 2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。 二. 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。 3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。 4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。 下面T25瓶為類; 1,細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗一遍后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2,4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1x10E6/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。 3,將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。



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