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賽諾利康生物技術(北京)有限公司>>技術文章>>培養基的選擇及更換

培養基的選擇及更換

閱讀:4208        發布時間:2020/5/28
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盡管絕大多數細胞系都可以在不止一種培養基內生長,客戶既可以選用來自不同供應商的商品化培養基,也可以使用自行配制的培養基。但是,值得注意的是,來自不同供應商的培養基,即便是擁有類似甚至相同的名稱,配方及培養細胞的性能等方面也不盡相同。而自行配制的培養基,雖然成本很低,但是一方面配制比較繁瑣,費時費力。另一方面,配制*培養基所需要的基礎培養基、細胞添加因子、血清等原材料極有可能存在批次間的差異,很難保證不同批次*培養基的穩定性。


此外,任何培養條件的改變都有可能造成細胞系特性的改變。因此,為保證整個實驗過程中細胞系的穩定,建議從一開始就選用推薦使用的培養基、培養基添加物等培養體系進行培養。


在某些特殊情況下,如確實需要更換培養基,可按照以下步驟進行操作,逐步使細胞適應新的培養基:


1. 以1:2的傳代比例將細胞一分為二到兩個新的培養皿內繼續培養,其中一個培養皿作為對照,繼續使用原來的培養基培養。另一個培養皿作為實驗組,使用新舊培養基按照1:1配比混合后的培養基培養。


注意:采用相對較低的傳代比例1:2進行傳代,目的是緩解傳代過程及新培養基給細胞生長帶來的雙重壓力。


2. 分別監測兩個培養皿內細胞形態、生長速率等方面的變化。如果兩個培養皿內的細胞沒有明顯差異,則接下來仍然按照1:2的傳代比例分別進行第二次傳代。對照組仍然使用舊的培養基培養,而實驗組則采用新舊培養基按照3:1配比混合(25% original, 75% new)后的培養基培養。


3. 繼續監測兩個培養皿內細胞形態、生長速率等方面的變化。如若兩者之間無明顯差異,則分別繼續進行第三次傳代。在第三次傳代時仍然按照1:2的傳代比例進行,實驗組使用新舊培養基按照7:1(12.5% original, 87.5% new)配比混合的培養液培養。對照組仍使用舊的培養基培養。


4. 繼續監測實驗組和對照組細胞形態、生長速率等方面的變化。如若兩者之間仍然無明顯差異,則分別按照1:2的傳代比例繼續進行第四次傳代。此時,對照組仍使用舊的培養基培養,而實驗組則*更換成新的培養基培養。此時,細胞應該已經*適應新的培養基了。


注:為確認細胞是否已經*適應新的培養基,可以分別對兩組細胞進行功能性測試。如果在功能性測試過程中任何一個時候,實驗組表現與對照組不同,重復步驟2、3多傳幾代,直至與對照組細胞*一致。


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