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如何用生物指示劑法測定滅菌器的效果

閱讀:1543        發(fā)布時間:2022/9/29
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高壓蒸汽滅菌器由滅菌室、控制系統(tǒng)、過壓保護裝置等組成。利用高溫飽和水蒸汽在一定時間內可使微生物的蛋白質變性導致微生物死亡的功效,達到對耐濕耐熱物品進行滅菌的目的。
生物指示劑法:
原理:利用非致病性的嗜熱脂肪桿菌的芽孢作為指示菌,來測定熱力滅菌的效果。嗜熱脂肪桿菌的芽孢對熱的抗性較強,其耐熱能力與病原微生物肉毒梭菌芽孢相似,以此為指示菌,驗證滅菌器能否達到滅菌要求。
生物指示劑分為三種:芽孢懸液、芽胞菌片、菌片和培養(yǎng)基混合指示管。一般放在滅菌容器的5個點:下層的前、中、后和上層、中層的中央點。滅菌后取指示劑接種到溴甲酚紫-葡萄糖蛋白胨水中,55-60℃培養(yǎng)2-7天,若培養(yǎng)基澄清、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死,滅菌器滅菌效果良好;如果培養(yǎng)基黃色渾濁,說明芽孢未被殺滅,滅菌器滅菌效果不合格。芽孢懸液和芽孢菌片的驗證方法均是如此。
目前實驗室還常用商品化的生物指示管,其原理與芽孢懸液和芽胞菌片相同,指示管中有嗜熱脂肪芽孢桿菌芽孢和培養(yǎng)液玻璃小管,將指示管放在滅菌容器內的各個點上,高壓滅菌后,將管中盛培養(yǎng)液的玻璃管擠碎,培養(yǎng)液從內部的小管中被放出,放入56℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),同時做陽性對照。若是滅菌器滅菌效果不合格,指示管內的芽孢復活后生長會改變肉湯的顏色是肉湯變?yōu)辄S色;若是滅菌器滅菌效果良好則管內芽孢被滅活不再生長,肉湯仍舊是原來的紫色。
 

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