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賽爾瑞成（北京）生命科學(xué)技術(shù)有限公司
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干貨｜ 細(xì)胞復(fù)蘇/凍存/傳代之實(shí)驗(yàn)操作及注意事項(xiàng)
一、細(xì)胞培養(yǎng)前期準(zhǔn)備工作細(xì)胞培養(yǎng)儀器設(shè)備：◆細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥（即生物安全柜）◆培養(yǎng)箱（通用推薦：濕式二氧化碳培養(yǎng)箱）◆離心機(jī)◆醫(yī)用冰箱（4℃）和冰柜（-20℃）、生物超低溫冰箱（-80℃）、液氮冷凍罐◆倒置顯微鏡其他用品：細(xì)胞培養(yǎng)容器（培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、多孔板等），吸管和移液器，培養(yǎng)基、血清和試劑注意事項(xiàng)：◆無(wú)菌工作區(qū)域：細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室的主要要求是需要維持細(xì)胞培養(yǎng)操作工作區(qū)域處于無(wú)菌狀態(tài)，簡(jiǎn)單經(jīng)濟(jì)的方式就是使用細(xì)胞培養(yǎng)通風(fēng)櫥。◆無(wú)菌試劑和培養(yǎng)基：商品化試劑和培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)量控制以確保無(wú)菌，注意操 -
賽爾瑞成星推薦 逆轉(zhuǎn)錄酶（Reverse Transcriptase）
cDNA合成是基因表達(dá)研究的關(guān)鍵步驟，而逆轉(zhuǎn)錄酶（ReverseTranscriptase）的質(zhì)量和效率是產(chǎn)生穩(wěn)定完整cDNA的保證條件。低效的逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)會(huì)降低cDNA產(chǎn)量和質(zhì)量，從而影響基因表達(dá)研究的靈敏性，甚至產(chǎn)生假陰性結(jié)果。因此，選擇高效穩(wěn)定的逆轉(zhuǎn)錄酶（ReverseTranscriptase）至關(guān)重要。賽爾瑞成提供CrgScriptⅠ和CrgScriptⅡ兩種逆轉(zhuǎn)錄酶，均屬于高效耐熱型逆轉(zhuǎn)錄酶，有更高的熱穩(wěn)定性。其在50°C時(shí)仍具有更高的熱穩(wěn)定性和更長(zhǎng)的半衰期，并且RNaseH活性較低， -
大腸桿菌表達(dá)宿主菌的訂購(gòu)、運(yùn)輸及保存、以及如何復(fù)蘇、長(zhǎng)期保存
一、訂購(gòu)賽爾瑞成提供多種大腸桿菌宿主菌，如需訂購(gòu)，可提供兩種形式的宿主菌供您選擇：穿刺菌和甘油菌，貨期均是2-3天.穿刺菌制備方式：將菌種搖瓶活化（對(duì)數(shù)期），預(yù)先在1.5ml的EP管中加入半固體瓊脂培養(yǎng)基，把活化過(guò)的菌種用牙簽穿刺接種于半固體瓊脂培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)一個(gè)晚上即可。甘油菌制備方式：將菌種搖瓶活化，培養(yǎng)至對(duì)數(shù)期，取適量菌液于小管中，加入終濃度為10%-20%的滅菌甘油，混勻后即可，直接置于-80℃保存。二、運(yùn)輸及保存方式穿刺菌的運(yùn)輸及保存方式：2-8℃運(yùn)輸，4℃冰箱保存一周。甘油菌的 -
使用無(wú)血清細(xì)胞凍存液凍存雜交瘤細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)
在單克隆抗體的制備過(guò)程中，及時(shí)凍存原始孔的雜交瘤細(xì)胞以及克隆化得到的亞克隆細(xì)胞是十分重要的。因?yàn)樵跊](méi)有建立一個(gè)穩(wěn)定分泌抗體的細(xì)胞系的時(shí)候，細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中隨時(shí)可能發(fā)生細(xì)胞的污染、細(xì)胞突變、分泌抗體能力的喪失等等。如果沒(méi)有原始細(xì)胞的凍存，則可能因上述意外而前功盡棄。因此，雜交瘤細(xì)胞的凍存在單克隆抗體制備過(guò)程中起著關(guān)鍵性作用。目前，雜交瘤細(xì)胞的凍存方法同其他細(xì)胞系的凍存方法是一樣的。傳統(tǒng)雜交瘤細(xì)胞的凍存：傳統(tǒng)細(xì)胞凍存液的組分：培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合，或90%的血清+10%DMSO傳 -
Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用手冊(cè)
Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液使用手冊(cè)可申請(qǐng)領(lǐng)取試用裝Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液介紹1.是一種通用型的細(xì)胞凍存液，可用于凍存人和各種動(dòng)物細(xì)胞株；2.*凍存液配方，即開(kāi)即用，方便快捷；3.非程序降溫，-80℃低溫冰箱凍存長(zhǎng)達(dá)5年；4.特別配方（主要成分為DMSO和氨基酸）具有有效提高細(xì)胞凍存活率和復(fù)蘇活力；5.不含動(dòng)物來(lái)源性蛋白，能減少各類(lèi)病毒、霉菌和支原體等的污染，確保凍存細(xì)胞安全；6.可孔板（細(xì)胞培養(yǎng)板）凍存，可用于雜交瘤細(xì)胞的凍存液。Cellregen無(wú)血清細(xì)胞凍存液存儲(chǔ)條件儲(chǔ)存 -
無(wú)血清細(xì)胞凍存液對(duì)比含血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)勢(shì)
細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長(zhǎng)期保存的常用方法，其中細(xì)胞凍存液，作為細(xì)胞凍存時(shí)必須使用的一種溶液，不僅僅是說(shuō)只是用來(lái)進(jìn)行細(xì)胞的保存，在細(xì)胞的購(gòu)買(mǎi)、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送過(guò)程中也起著關(guān)鍵作用，因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會(huì)形成冰晶，能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等，從而引起細(xì)胞死亡。而細(xì)胞凍存液就相當(dāng)于細(xì)胞的保護(hù)劑，在凍存細(xì)胞時(shí)將細(xì)胞懸浮于凍存液中，可使冰點(diǎn)降低，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性， -
賽爾瑞成（Cellregen）系列表達(dá)載體選擇指南！
賽爾瑞成(Cellregen)技術(shù)團(tuán)隊(duì)常年從事大腸桿菌原核表達(dá)重組蛋白制備工作，從而積累了pET系列、pGEX系列、pMAL系列等多種原核表達(dá)載體。同時(shí)，在這些常規(guī)表達(dá)載體的基礎(chǔ)上，還自主優(yōu)化構(gòu)建了一系列的特色載體，使其分別具有提供表達(dá)量、促進(jìn)分泌表達(dá)、促進(jìn)可溶表達(dá)、促進(jìn)二硫鍵形成等特征。那么，到底如何來(lái)選擇適合的表達(dá)載體呢？可參考下表：載體名稱(chēng)啟動(dòng)子信號(hào)肽N-末端標(biāo)簽C-末端標(biāo)簽蛋白酶切點(diǎn)抗性載體大小載體特點(diǎn)pET21a(+)T7T7tagHis6tag氨芐霉素5443bp強(qiáng)啟動(dòng)子，表達(dá)量高p
