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胰蛋白酶是一種絲氨酸蛋白酶，可特異切割賴氨酸及精氨酸C末端肽鍵。傳統(tǒng)的胰蛋白酶由豬、牛和羊等動物的胰臟提取獲得，曾被廣泛應(yīng)用于生物制品的生產(chǎn)。動物來源的胰蛋白酶有引入外源性病毒的風(fēng)險，例如在上世紀(jì)60年代，曾發(fā)生脊髓灰質(zhì)炎疫苗、減毒黃熱活疫苗檢出SV40病毒和禽白血病病毒的事件，2010年，某廠家的輪狀病毒疫苗檢出了豬圓環(huán)病毒序列。中國藥典2020版三部指出：“生物制品的原材料及輔料……應(yīng)盡可能選擇無病毒安全性風(fēng)險或低風(fēng)險的原材料和輔料用于生物制品生產(chǎn)，如選擇采用重組技術(shù)生產(chǎn)的生物材料替代動物源性生物材料“（中國藥典2020年版三部25頁）。
胰蛋白酶分子結(jié)構(gòu)
大腸桿菌表達的重組胰蛋白酶具有與動物胰臟提取的胰蛋白酶相似的作用，純化后由不少于70%的 β-Trypsin和不多于20%的 α-Trypsin組成。
逐典重組胰蛋白酶消化液是自研的微生物發(fā)酵產(chǎn)生的高純度重組酶消化液，用于解離多種貼壁哺乳動物細胞，包括VERO、MDCK、人二倍體細胞、293、CHO-K1、雞胚原代細胞等，可廣泛應(yīng)用于各種生物技術(shù)過程中：如原代細胞的獲取，組織塊的消化解離、貼壁細胞的傳代消化、特異性的蛋白質(zhì)酶解等。它的特異性更強而且毒性更低。
逐典重組胰蛋白酶是一款滿足藥典要求的GMP級非動物源胰蛋白酶
Trypelectase 重組胰蛋白酶是逐典生物專門為疫苗、病毒載體生產(chǎn)設(shè)計，具有高效、非動物源和高質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的特點。該胰蛋白酶氨基酸序列與豬胰腺來源的胰蛋白酶一致，由大腸桿菌(E.col) 重組表達生產(chǎn)。在GMP級別環(huán)境中生產(chǎn)的重組胰蛋白酶能高效消化貼壁細胞且不造成傷害，產(chǎn)品質(zhì)量滿足藥典要求。
逐典重組胰蛋白酶特點
1.GMP級生產(chǎn)環(huán)境、符合藥典標(biāo)準(zhǔn)
2.重組生產(chǎn)、不含雜酶
3.批量生產(chǎn)、質(zhì)量穩(wěn)定
4.高純度、高比活
5.非動物源原料
逐典重組胰蛋白酶應(yīng)用場景
組織塊的消化解離和原代細胞的獲取、貼壁細胞的傳代消化和收獲、微載體方法培養(yǎng)的細胞消化和收獲。
實驗數(shù)據(jù)
CT26.WT 和 HEK293FT 細胞消化實驗
CT26WT和HEK293FT在經(jīng)Trypelectase重組胰酶消化3min后解離效果較好，細胞活率顯示對細胞傷害較小，不會影響細胞傳代。
Trypelectase重組豬胰酶對細胞消化過程及傳代24h細胞貼壁圖
