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核酸,這一名詞已經,尤其在接種現場發現核酸殘留,曾一度引起恐慌,隨著研究及取樣調查的深入,人們了解了產生陽性的原因,同時對生物制品的核酸殘留也有了一定的認識。用于疾病治療或預防的生物制品有著嚴格的質量控制,其中核酸殘留是各項質控標準的重中之重。
生物制品的核酸殘留具有潛在的危害性。生物制品的宿主細胞大多是連續傳代細胞,擁有無限增殖的能力。殘留的宿主細胞核酸可能會在人體內造成細胞增殖失控,變為腫瘤細胞。核酸殘留可能存在感染性病毒基因,增加體內免疫反應。因此,從生物制品安全角度和科研需求,進行有效的核酸殘留去除,是非常重要的。
我國參照WHO、FDA和歐盟標準,在藥典中對生物制品的核酸殘留量有明確規定。生物制品的核酸殘留主要集中在重組蛋白、抗體及疫苗的大規模純化及生產過程。藥典規定要求酵母、大腸桿菌表達的生物制品中DNA殘留量不超過10ng/劑,CHO和Vero細胞表達的EPO、狂犬疫苗、乙肝疫苗等不超過100或10pg/劑。
在一般的情況下,含氯消毒液、紫外燈照射等能夠消除環境或產品表面的核酸,但是對于生物制品在生產過程中產生的核酸,就需要專業的核酸去除劑了。現在大多選擇核酸酶進行去除。核酸酶能夠消除核酸殘留的潛在危害,降低樣品粘度,提高產品純化效率。
Pannarase是一種來自于粘質沙雷氏菌(Serratia marcescens),經基因工程改造的核酸內切酶。Pannarase高活性地降解各種類型的DNA和RNA,包括雙鏈、單鏈、線狀、環狀等,將核酸降解成3~5個堿基長度的5’-單磷酸寡核苷酸,所以又被稱為“全能核酸酶"。
一,逐典Pannarase全能核酸酶優勢
1.GMP條件生產 高比酶活 無動物源
2.高效核酸降解力
3.高質控標準 嚴格內毒素控制
4.無His標簽,無氨芐青霉素
1.全能核酸酶應用條件
全能核酸酶的酶活會受到多種因素的影響(例如溫度、pH、離子強度等),故用量范圍也會從0.1 U/mL-250 U/mL不等。因此,不同的操作環境下酶的最佳濃度不同,需要通過實驗設置梯度進行最佳條件的摸索。
應用實例:
樣品:狂犬病毒濃縮液
處理條件:核酸酶濃度50~90U/ml ,
37 ℃處理 2 h,轉入18 ~ 26 ℃處理 6h


樣品:狂犬病病毒濃縮液
處理條件:25、50和100 U/ml,37℃


樣品:流感病毒濃縮液
處理條件:10 U/mL,37℃

