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淺析單細胞分離的主要應用和特點
閱讀：543 發布時間：2020-7-15
單細胞分離是一種從待分離的材料中直接分離單個細胞進行培養獲得純培養的方法，該法在顯微鏡下操作，對于體積較大的微生物，可以用毛細管提取微生物個體；對較小的細胞或孢子，可以用顯微針、鉤、環等挑取以獲得單細胞；也可將適當稀釋后的樣品制成小液滴，在顯微鏡下選取只含有一個細胞的液滴培養。
單細胞分離快速高效接種單個活細胞至微孔板，主要功能為高效柔和地分離或分選活的單細胞，該系統通過微流控技術柔和地形成細胞液滴，同時利用白光和熒光成像實時分析細胞數量和熒光強度，將符合要求的單細胞液滴準確接種至96孔板或384孔板等微孔板中。
整合分離過程中避免液體剪切力、電壓、超聲等影響，以維持高細胞存活率，減少對細胞的脅迫壓力，便于后續培養或分析，主要應用包括細胞株開發、稀有細胞分離、單細胞基因組測序和單細胞RNA測序等。
高通量單細胞分離系統：白光系統，根據細胞直徑、圓度的形態指標篩選特定細胞；白光+熒光系統，根據細胞直徑、圓度以及熒光強度篩選特定細胞。
主要特點：
1、分離效率>85%，單細胞活率>75%；
2、記錄分離前后的連續5張圖像，用于支持細胞株的單克隆性；
3、采用一次性分離槽，省卻系統的清洗驗證，交叉污染的風險；
4、采用白光成像和熒光成像，可根據細胞直徑、圓度以及熒光強度篩選出感興趣的細胞；
5、內置除靜電裝置，消除微孔板靜電，確保細胞液滴接種至微孔正中間，尤其是PCR板。