目錄:杭州新喬生物科技有限公司>>熒光探針>> 細胞膜電位探針CAS：70363-83-6，DiBAC4（3）熒光探針
| 供貨周期 | 現貨 | 規格 | 10mg |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 科研實驗 |
CAS：70363-83-6，DiBAC4(3)熒光探針
CAS：70363-83-6，DiBAC4(3)，細胞膜電位熒光探針
CAS#：70363-83-6
英文名：Bis(1,3-dibutylbarbituric acid)trimethine oxonol
分子式：C27H39N4O6
分子量：515.62
結構式：
性質：
1. 外觀：紅色粉末
2. 純度：≥98%
3. 產品描述：
DiBAC4(3)是一種檢測細胞膜電位的親脂性陰離子熒光染料，它本身無熒光，當進人細胞與胞漿內的蛋白質結合后才發出熒光。DiBAC4(3)進入細胞，細胞內熒光強度增加，即膜電位增加表示細胞去極化；反之，細胞內熒光強度降低即膜電位降低表示細胞超極化。
4. 溶解及使用方法：
可以使用DMSO、無水乙醇和純水溶解，用DMSO溶解成10mM的母液儲存，如果低濃度也可以滿足要求也可用純水溶解。
I. 用熒光顯微鏡測定膜電位的方法
（1）試劑
·DiBAC4(3)
·Dulbecco’s MEM (DMEM)
·FBS (fetal bovine serum)
（2）方法
1) 將消化好的細胞移至DMEM中。
2) 加入FBS，控制濃度范圍在：2～15% 。
3) 加入DiBAC4(3)，控制濃度范圍在：1～5 µmol/L。
4) 用熒光顯微鏡觀察刺激后熒光強度的變化。[Ar激光(488 nm) 的激光共聚焦顯微鏡]，由于DiBAC4(3)的熒光會隨溫度變化而改變，所以必須在37℃的條件下測定。由于細胞膜的電位會變化，可以觀察細胞質內的熒光強度變化。
II. 用酶標儀測定膜電位的方法
（1）試劑
·DiBAC4(3)
檢測用緩沖液 (pH7.4; 20 mmol/L HEPES, 120 mmol/L NaCl, 2 mmol/L KCl, 2 mmol/L CaCl2, 1 mmol/L MgCl2,5 mmol/L glucose)
（2）方法
1) 培養細胞：在微孔板中培養細胞
2) 清洗細胞：用含5 µmol/L DiBAC4(3) 的檢測用緩沖液200 µL，清洗微孔板中培養的細胞2次
3) 染色：在孔板中加入180 µL含5 µmol/L DiBAC4(3) 的檢測用緩沖液，在5%CO2，37℃培養箱中孵育30分鐘。
4) 測定：用熒光酶標儀觀察刺激后熒光強度的變化。由于DiBAC4(3)的熒光會隨溫度變化而改變，所以必須在37℃的條件下測定，加入20 µL含DiBAC4(3) 的檢測用緩沖液，每隔30秒測定1次熒光變化。
III. 膜電位的標準曲線
（1）原理
膜電位變化時色素的分布也隨之變化，所以熒光和吸收也會變化。這種變化程度取決于色素的分子數和細胞數的比率、色素的濃度以及細胞的種類。膜電位的標準曲線是通過用電極直接測定目的細胞的膜電位，在該電位所測得的熒光和吸收強度而制得的。
（2）試劑
·DiBAC4(3)
·Eagle-Dulbecco medium
·PBS
（3）方法
1) 用Eagle-Dulbecco medium培養細胞。
2) 取PBS中的細胞在37℃的CO2培養箱中孵育30～60分鐘，然后改變孵育時間，制備不一樣的CO2濃度的樣品。
3) 加入DiBAC4(3)，終濃度為2 µmol/L。
4) 20分鐘后，在517 nm測定各個濃度的熒光強度，并用電極直接測定此時的電位差。
5) 用熒光強度和對應的電位差來制作標準曲線。
（4）其他方法
有鉀擴散電位和熒光或吸收強度比較的方法。纈氨霉素引起鉀擴散電位，鉀擴散電位 (V) 是按照Nernst 方程計算如下：
V= -RT／F log[K+]in／[K+]out = -59 log[K+]in／[K+]out (mV)
所以在纈氨霉素存在時，通過改變細胞外鉀離子濃度和細胞內鉀離子濃度，計算擴散電位，測定各個電位的熒光或吸收強度，比較后可以得到標準曲線。
儲存條件：-20℃干燥避光保存，有效期一年。
供應商：杭州新喬生物科技有限公司
CAS：70363-83-6，DiBAC4(3)熒光探針
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CAS：70363-83-6，DiBAC4(3)熒光探針
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