噻嗪敏感的氯化鈉共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白NCC是體內(nèi)主要的NaCl轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白遠(yuǎn)端曲小管（DCT）在維持血壓方面起著重要作用（Rosenbaek等，2014；馮等，2015）。NCC在Thr-53、Thr-58和Ser-71處的磷酸化是NCC功能的重要介質(zhì)（Rosenbaek等人，2014）。NCC按規(guī)定循環(huán)至質(zhì)膜，在刺激后，它可以被磷酸化，從而增加NCC活性并減少NCC內(nèi)吞作用，同時(shí)增加DCT中的NaCl轉(zhuǎn)運(yùn)（Feng等人，2015）。

艾美捷抗NCC（噻嗪敏感NaCl共轉(zhuǎn)運(yùn)體）（Thr53）抗體：

目錄編號(hào)：p1311-53

宿主物種：兔多克隆

格式：從混合血清中親和純化的抗原

應(yīng)用：WB（Western Blot）1:1000-1:6000，IHC（免疫組化）1:100-1:10,000

測(cè)試物種：人、小鼠、大鼠

預(yù)期反應(yīng)性：豚鼠、倉(cāng)鼠

免疫原：合成的磷酸化肽段，對(duì)應(yīng)于小鼠NCC蛋白中Thr53周?chē)陌被釟埢?，與鑰匙孔蛤血藍(lán)蛋白（KLH）結(jié)合。

分子量：160 kDa

引用此抗體：PhosphoSolutions 目錄號(hào)p1311-53，RRID: AB_2650477

特異性：特異于在Thr53位點(diǎn)磷酸化的約160 kDa NCC蛋白的內(nèi)源性水平。感興趣的條帶可能會(huì)因?yàn)樘腔霈F(xiàn)模糊。使用λ-磷酸酶處理可以w全消除免疫標(biāo)記。

生產(chǎn)/純化：通過(guò)在磷酸化和非磷酸化肽親和柱上的順序?qū)游?，從混合兔血清中親和純化制備。

質(zhì)量控制：每批進(jìn)行Western blot檢測(cè)。

緩沖液：10 mM HEPES（pH 7.5），150 mM NaCl，每毫升100 µg BSA和50%甘油。

儲(chǔ)存：建議在-20°C下儲(chǔ)存，由于含有50%甘油，可以取出小份量而不進(jìn)行凍融循環(huán)。

穩(wěn)定性：自收到日期起，至少在-20°C下穩(wěn)定1年。

抗NCC（噻嗪敏感NaCl共轉(zhuǎn)運(yùn)體）（Thr53）抗體圖例：

左圖：小鼠腎臟裂解物的Western blot結(jié)果顯示，在第一道（-）中特異性免疫標(biāo)記了約160 kDa的NCC蛋白，該蛋白在Thr53位點(diǎn)被磷酸化。第二道（+）顯示了磷酸化特異性，其中免疫標(biāo)記通過(guò)與lambda磷酸酶（λ-Ptase，1200單位處理30分鐘）處理膜片被w全消除。

右圖：對(duì)WT（野生型）和NCC KO（敲除型）小鼠的PFA灌注冷凍腎臟切片進(jìn)行免疫染色，顯示了在Thr53位點(diǎn)被磷酸化的NCC蛋白的特異性標(biāo)記（目錄號(hào)p1311-53，紅色，1:100,000），在頂部可以看到，而在KO（底部）則沒(méi)有染色。（圖片由Lauren Miller，Ellison實(shí)驗(yàn)室，OHSU提供。）

抗NCC（噻嗪敏感NaCl共轉(zhuǎn)運(yùn)體）（Thr53）抗體文獻(xiàn)參考：

Shu, T.-T., Gao, Z.-X., Mao, Z.-H., Yang, Y.-Y., Fu, W.-J., Pan, S.-K., Zhao, Q.-Q., Liu, D.-W., Liu, Z.-S. and Wu, P. (2024). Defective natriuresis contributes to hyperkalemia

in db/db mice during potassium supplementation. Journal of Hypertension. [online]

Wu, P., Li, S.-T., Shu, T.-T., Mao, Z.-H., Fu, W.-J., Yang, Y.-Y., Pan, S.-K., Liu, D.-W., Liu, Z.-S. and Gao, Z.-X. (2024). Impaired distal renal potassium handling in streptozotocin-induced diabetic mice. American Journal of Physiology. Renal Physiology, [online] 327(1), pp.F158–F170.

Zuchowski, Y., Carty, J.S., Trapani, J.B., Watts, J.A., Bock, F., Zhang, M., Terker, A.S., Zent, R., Delpire, E., Harris, R.C. and Arroyo, J.P. (2024). Kidney collecting ductderived vasopressin is not essential for appropriate concentration or dilution of urine. American Journal of Physiology. Renal Physiology, [online] 326(6), pp.F1091–F1100.

Aly, R., Darwish, S., Bala, N., Ebrahim, A., Shoemaker, L.R., McCray, J., Garrett, T.J. and Alli, A.A. (2024). Functional and metabolomic analysis of urinary extracellular

vesicles from juvenile mice with renal compensatory hypertrophy. Biochimica Et Biophysica Acta. Molecular Basis of Disease, [online] 1870(5), p.167096.

Castro, P.C., Santos-Rios, T.M., Martins, F.L., Crajoinas, R.O., Caetano, M.V., Lessa, L.M.A., Luchi, W.M., McCormick, J.A. and Girardi, A.C.C. (2024). Renal upregulation

of NCC counteracts empagliflozin-mediated NHE3 inhibition in normotensive but not in hypertensive male rat. American Journal of Physiology. Cell Physiology,[online] 326(6), pp.C1573–C1589.