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培養(yǎng)液pH對(duì)細(xì)胞的影響?

閱讀:2476        發(fā)布時(shí)間:2021/1/21
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培養(yǎng)液pH對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響?

由于大多數(shù)細(xì)胞適宜pH為7.2-7.4,偏離此范圍可能對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)將產(chǎn)生有害的影響。但各種細(xì)胞對(duì)pH的要求也不*相同,原代培養(yǎng)細(xì)胞一般對(duì)pH變動(dòng)耐受差,無(wú)限細(xì)胞系耐受力強(qiáng)。但總體來(lái)說(shuō),細(xì)胞耐酸性比耐堿性強(qiáng)一些。在配制培養(yǎng)用液時(shí),需要注意一點(diǎn):培新配的培養(yǎng)基在經(jīng)過(guò)0.10um或0.22um濾膜過(guò)濾時(shí),溶液的pH還會(huì)向上浮動(dòng)0.2左右。

培養(yǎng)液pH下降很快可能原因有哪些?其解決辦法是什么?

通常細(xì)胞生長(zhǎng)得非常快時(shí),pH值通常下降得很快。此時(shí)可以及時(shí)傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進(jìn)行解決。此外,培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊、NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細(xì)菌、酵母或真菌污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。

(1)按培養(yǎng)液中NaHCO3 濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2 濃度,2.0g/L 到3.7g/L 濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5%到10%。

(2)改用不依賴CO2培養(yǎng)液。

(3)松開(kāi)瓶蓋1/4 圈。加HEPES 緩沖液至10 到25mM終濃度。

(4)在CO2 培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle′s 鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks 鹽配制的培養(yǎng)液。

(5)如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物或用抗生素除菌。

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