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杭州仟諾生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>總結(jié)Hyclone胎牛血清的相關(guān)知識點

總結(jié)Hyclone胎牛血清的相關(guān)知識點

閱讀:1471        發(fā)布時間:2020/6/2
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   Hyclone胎牛血清使用方法:
  在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,經(jīng)常加入5%-20%的Hyclone胎牛血清澳洲,常使用的Hyclone澳洲胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細(xì)胞的基因表達(dá)譜,影響后續(xù)實驗的結(jié)果,我們在實驗中使用10%的Hyclone澳洲胎牛血清培養(yǎng)293T細(xì)胞,效果非常好。但是有些細(xì)胞也會使用5%的Hyclone FBS或者20%的Hyclone胎牛血清,要根據(jù)具體細(xì)胞選擇合適的胎牛血清濃度。
  HyClone胎牛血清保存方法:
  (1)長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.
  (2)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清.
  (3)血清解凍:瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
  如何避免HyClone胎牛血清中產(chǎn)生沉淀?
  按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
  (1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
  (2)血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
  (3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
  (4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
  (5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
  (6)若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。

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