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杭州仟諾生物科技有限公司>>技術文章>>人源細胞系常規培養傳代流程

人源細胞系常規培養傳代流程

閱讀:1854        發布時間:2020/5/19
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   人源細胞系作為體外模型而被廣泛應用于生物醫學研究。正確數據的獲得常依賴于細胞系的特性,尤其是當它用來替代其來源者的組織時。
  人源細胞系常規培養傳代流程:
 ?。?)吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃?-2min)
  (2)注意培養基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存
 ?。?)取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的*培養基,把細胞懸液打勻,于培養箱中培養
  (4)鏡下觀察消化情況,在HS505.T人淋巴結成纖維樣細胞生長特性邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml*培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散。
  人源細胞系的培養注意事項:
  1.傳代培養時要注意無菌操作并防止細胞之間的交叉污染,所有操作要盡量靠近酒精燈火焰。每次只進行一種細胞的操作。每一種細胞使用一套器材,培養用液應嚴格分開。
  2.每天觀察細胞形態,掌握好細胞是否健康的標準:健康細胞的形態飽滿,折光性好,生長致密時即可傳代。
  3.如發現細胞有污染跡象,應立即采取措施,一般應棄置污染的細胞,如果必須挽救,可加含有抗生素的BSS或培養基反復清洗,隨后培養基中加入較大量的抗菌素,并經常更換培養基等。
  人源細胞系的相關資料就先介紹到這里了,如果您還想要了解更多內容,還請多多關注好我們,小編會不定期在此跟大家來分享的,相信這些內容對您的了解也是有一定幫助的。

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