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血清質檢方法和重要作用

閱讀:1774      發布時間:2017-10-9
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細胞培養基的構成中動物血清對細胞的生長繁殖起著重要作用。在動物血清中牛血清的應用又是zui廣泛的,所以想要細胞在培養過程中長的好、穩定,牛血清的質量好壞直接影響生物研究的質量和安全性,使用質量好的牛血清也是細胞培養中的重要環節。

       血清是提供生長激素、營養物,以及低分子營養物;提供結合蛋白;能結合或調變它們所結合的物質活力;是細胞貼壁、鋪展生長所需因子的來源;起酸堿度緩沖液作用;提供蛋白酶抑制劑;細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受損傷;能與有毒金屬和熱源物質結合,起到解毒作用。

 

 

      血清分類
      胎牛血清:八月齡胎牛心臟穿刺取血
      新生牛血清:出生12-24小時新生牛靜脈采血
      小牛血清:出生三月齡小牛動脈采血分離血清
      血清來源
      來自國內非疫區,有說明血清來源的證明資料:包括收集過程的全部資料、檢驗結果和交付情況。
      血清收集
      胎牛血清是心臟穿刺取血,新生牛(10~14天)和小牛(10個月內)血清靜脈取血。血清在低溫下采集、一次分離、分離后立即混合凍存,符合工業生產的標準。
      血清制備
      1、熱滅活血清(非必須)
      2、γ-射線照射:γ-射線照射可以有效滅活血清中可能污染的病毒、支原體。
      3、除菌過濾:胎牛血清要通過三層100nm過濾。
      血清質檢方法
      ⑴、化學檢測
      A 生化檢測:膽固醇、甘油三酯、膽紅素 、尿素、尿酸、葡萄糖、谷丙轉氨酶、高筒、體  酮、雌二醇等檢測
      B 微量元素檢測:鉀、鈉,鐵、氯化物、鈣、鎂、總鐵結合力、血清唾液酸等檢測
      C 蛋白檢測:白蛋白和球蛋白檢測
      ⑵、微生物檢查
      ①、細菌和真菌:直接培養法
      ②、支原體檢測:培養法,DNA熒光染色
      ③、病毒檢測:直接熒光抗體檢測
      牛蘭舌病毒 Bovin blue tongue;
      牛腺病毒 Bovine Adenovirus;
      牛細小病毒 Bovine Parvovirus;
      牛病毒性腹泄病毒 Bovine Viral Diarhea Virus;
      狂犬病病毒 Rabies;
      呼腸弧病毒 Reovirus;
      牛呼吸道合胞病毒 BRSV;

      副流感病毒Ⅲ型 Parainfluenza。

      工欲善其事必先利其器,所以選擇好的血清也相當的重要,為了更好的培養細胞,一定要選擇正規質量好的血清,不要隨便使用便宜的,導致zui后的科研成果不理想。

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