島津應用:LCMS法測定不同哺乳動物細胞培養基組分差異
哺乳動物細胞培養時一般需加入一定量血清,以提供必要的營養成分和細胞調節因子。但是實際生產時很難保證不同批次間血清的一致性,而且血清對哺乳動物細胞存在潛在的毒性作用和外源污染等。為了避免不同批次間血清的質量變動,提高細胞培養和實驗結果的重復性,避免血清對細胞的毒性作用和血清源性污染等,很多細胞培養基開發商開始研究開發無血清細胞培養基,即在細胞培養基中加入某些組分來替代血清。因此我們首先需要分析檢測添加了血清的培養基和未添加血清的培養基之間的差異性,盡可能多地分析培養基中各組分的相對含量以及不同組分間的配比。
為滿足快速全面分析細胞培養上清液組分,將基礎碳源、氮源、核苷酸酸、維生素和其他主要代謝物一起檢測分析,得到更多有關生物過程中的詳細信息,我們開發出“細胞培養上清液方法包”。該技術平臺采用超液相色譜三重四極桿液質聯用儀,僅需17分鐘,即可同時監測分析95種細胞培養上清液營養成份和代謝物的相對豐度變化。本文使用島津超液相色譜儀LC-30A和三重四極桿質譜LCMS-8050聯用,利用“細胞培養上清液方法包”建立了哺乳動物細胞培養基中營養物質和細胞代謝物的液相色譜-串聯質譜的同時分析方法,供相關人員參考。
島津三重四極桿質譜LCMS-8050
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