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島津應(yīng)用:“細(xì)胞培養(yǎng)上清液方法包”在體外生殖方面的應(yīng)用
體外受精是指哺乳動(dòng)物的精子和卵子在體外人工控制的環(huán)境中完成受精過(guò)程的技術(shù)。在生物學(xué)中,把體外受精胚胎移植到母體后獲得的動(dòng)物稱試管動(dòng)物。試管嬰兒是伴隨體外授精技術(shù)的發(fā)展而來(lái)的,是指分別將卵子與精子取出后,置于試管內(nèi)使其受精,再將胚胎前體受精卵移植回母體子宮內(nèi)發(fā)育成胎兒。試管嬰兒是用人工方法讓卵子和精子在體外受精并進(jìn)行早期胚胎發(fā)育,然后移植到母體子宮內(nèi)發(fā)育而誕生的嬰兒。細(xì)胞培養(yǎng)液對(duì)體外生殖細(xì)胞的成長(zhǎng)和發(fā)育有著至關(guān)重要的影響,而培養(yǎng)液中的大部分氨基酸對(duì)卵母細(xì)胞的體外受精具有能抑制作用,個(gè)別氨基酸則對(duì)體外受精具有能促進(jìn)作用。所以對(duì)培養(yǎng)液中的氨基酸進(jìn)行含量控制有著較為重要的意義。
本文利用島津公司的“細(xì)胞培養(yǎng)基上清液分析方法包”及超液相色譜三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀LCMS-8060對(duì)市售體外生殖用細(xì)胞培養(yǎng)液中的17種氨基酸組份進(jìn)行了準(zhǔn)確定量。結(jié)果顯示在0.25~12.5 ?mol/L 濃度范圍內(nèi)線性良好,相關(guān)系數(shù)r均大于0.9973。保留時(shí)間和峰面積的重復(fù)性測(cè)試結(jié)果的 RSD%分別優(yōu)于0.219%和5.54%。對(duì)市售培養(yǎng)液進(jìn)行了定量分析,結(jié)果顯示,該品牌產(chǎn)品標(biāo)示的含量范圍屬實(shí)。該方法快速,高靈敏度,為相關(guān)從業(yè)人員提供種了一種非常好的技術(shù)手段。
島津公司超液相色譜三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀LCMS-8060
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