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elisa試劑盒檢測中顯色液A和B有什么作用

時間:2017-5-8閱讀:8884
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elisa試劑盒簡介

酶聯免疫吸附試驗(enayme liked immunosorbent,ELISA)是20世紀70年代發展起來的一種檢測技術,因其具有敏感性高、特異性強、操作簡單等優點,被廣泛應用于各種抗原和抗體的測定,為輔助研究診斷與生物科研起到了積極的作用。

elisa試劑盒檢測中顯色液A和B有什么作用

酶聯免疫診斷試劑盒的底物A就是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2),底物B就是顯色劑B(含TMB),用于顯色。另外,常用的底物還有:

AP的底物,常用的為對-硝基苯磷酸脂(PNP),其反應物為黃色的對硝基酚,測讀波長為405nm2)GOD的底物,為葡萄糖,供氫體為對硝基藍四氮唑,反應產物為不溶性的藍色沉淀什么是TMB?TMB即四甲基聯苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強的基團,因此容易進入細胞與細胞器中的HRP反應,且由于這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產生粗大的、深蘭色沉淀物,這使得TMB成為組化實驗中的一種很好的發色團。同時反應產物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反應進行。

TMB的反應產物為深藍色,利于光鏡觀察,且反應產物越聚越大,常超出單個細胞器的范圍(而DAB則被限制在其內),故TMB反應的檢測閾較低。

由于上述優點,目前TMB常用于光鏡及超微結構水平的HRP及HRP-WGA神經投射的研究。需要注意的是:TMB顯色液中的A液和B液應在2h內新鮮配制。另外,TMB是一種較強的皮膚刺激劑,并有致癌的潛在可能,故使用時應帶手套及在通風條件下操作...酶聯免疫診斷試劑盒(上海科華的試劑盒)的底物A就是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2),底物B就是顯色劑B(含TMB),用于顯色。另外,常用的底物還有:1)AP的底物,常用的為對-硝基苯磷酸脂(PNP),其反應物為黃色的對硝基酚,測讀波長為405nm2)GOD的底物,為葡萄糖,供氫體為對硝基藍四氮唑,反應產物為不溶性的藍色沉淀,什么是TMB?TMB即四甲基聯苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是一種脂溶性較強的基團,因此容易進入細胞與細胞器中的HRP反應,且由于這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產生粗大的、深蘭色沉淀物,這使得TMB成為組化實驗中的一種很好的發色團。同時反應產物的沉淀,使得HRP的活性部位更加暴露,利于酶氧化反應進行。TMB的反應產物為深藍色,利于光鏡觀察,且反應產物越聚越大,常超出單個細胞器的范圍(而DAB則被限制在其內),故TMB反應的檢測閾較低。由于上述優點,目前TMB常用于光鏡及超微結構水平的HRP及HRP-WGA神經投射的研究。需要注意的是:TMB顯色液中的A液和B液應在2h內新鮮配制。另外,TMB是一種較強的皮膚刺激劑,并有致癌的潛在可能,故使用時應帶手套及在通風條件下操作。TMB經HRP作用后共產物顯藍色,目視對比鮮明。TMB性質較穩定,可配成溶液試劑,只需與H2O2溶液混和即成應用液,可直接作底物使用。另外,TMB又有無致癌性等優點,因此在ELISA中應用日趨廣泛。酶反應用HCL或H2SO4終止后,TMB產物由藍色呈黃色,可在比色計中定量,zui適吸收波長為405nm。ABTS雖不如OPD和TMB敏感,但空白值極低,也為一些試劑盒所采用。

    我司elisa試劑盒的優點:操作簡單、快速、靈敏度高、特異性強、性價比高、樣品所需量少

1.操作簡單、快速。所有操作步驟,都有圖譜示意,讓你簡單明了,不必為研究操作步驟而耽擱時間。

2.靈敏度高。 酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導大量的催化反應 ,產生可供觀察的顯色反應現象。我們的試劑盒實現了在ug、ng、pg水平上對其進行定量。

3.特異性強。特異性來自抗體或抗原的選擇性。采用的*抗體抗原,保證的試劑盒品質。

4.性價比高,質量穩定。

5.樣品所需量少。

如果需要了解該產品詳細信息歡迎大家。

 

 

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