聯系電話
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級會員·13年
- 聯系人：
- 曹女士
- 電話：
- 400-6111-883
- 手機：
- 售后：
- 4006-111-883
- 傳真：
- 86-21-34615995
- 地址：
- 上海市浦東新區天雄路166弄1號3樓
- 網址：
- www.yeasen.com
掃一掃訪問手機商鋪
產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
|---|
產品介紹
產品簡介
本產品是一款采用公司自主研制的雙抗體進行雙封閉的熱啟動DNA聚合酶，不僅封閉了Taq DNA聚合酶5'→3'聚合酶活性，同時也封閉了5'→3'核酸外切酶活性。在預變性溫度下加熱30 sec封閉抗體即可失活，釋放出 DNA 聚合酶活性和核酸外切酶活性。雙封閉特性不僅能有效防止錯配或引物二聚體引起的非特異性擴增，又能有效抑制探針降解產生的熒光信號下降，雙重保障使體外檢測試劑在運輸或室溫使用過程中更加穩定。
此外，該產品經過翌圣生物 UCF.ME®超低殘留工藝處理，產品中核酸酶、宿主gDNA等殘留極低，搭配優化的緩沖體系（如 Cat#16716ES），可有效減少混樣、體系升溫階段以及長期儲存過程中引物探針互搭引起的非特異性擴增，支持引物探針提前預混的熒光定量PCR體系的開發。
產品信息
貨號 | 14321ES76 / 14321ES80 / 14321ES92 / 14321ES93 |
規格 | 1000 U / 10000 U / 25000 U / 100000 U |
組分信息
組分編號 | 組分名稱 | 14321ES76 (1000 U) | 14321ES80 (10000 U) | 14321ES92 (25000 U) | 14321ES93 (100000 U) |
14321 | UCF.ME® Advanced Hotstart Taq (20 U/μL) | 50 μL | 500 μL | 1.25 mL | 5 mL |
儲存條件
-25~-15℃保存，有效期2年。
使用說明
反應體系（以25 μL和50 μL為例）
貨號 | 組分名稱 | 體積（μL） | 體積（μL） |
16716-A | 5× PCR Buffer | 5 | 10 |
16716-B | MgCl2（250 mM） | 0.35 | 0.7 |
16716-C | dNTP Mix（25 mM each） | 0.25 | 0.5 |
14321 | UCF.ME® Advanced Hotstart Taq (20 U/μL) | 0.15 | 0.3 |
/ | Primer(10 μM) | 0.4 | 0.8 |
/ | Probe Mix (10 μM) | 0.2 | 0.4 |
/ | 模板 DNA | 1-20 | 1-30 |
/ | RNase Free H2O | to 25μL | to 50 μL |
【注】使用前務必充分混勻，避免劇烈震蕩產生過多氣泡。
a). dNTP濃度：建議dNTP終濃度為0.2 - 0.5 mM，如有特殊需求，可用25 mM each dNTP Mix以0.05 - 0.1 mM為間隔上下摸索dNTP的最佳使用濃度。
b). MgCl2濃度： 建議Mg 2+終濃度為1.5 - 5 mM，如有特殊需求，可用250 mM MgCl2以0.2 - 0.5 mM為間隔上下摸索Mg 2+的最佳使用濃度。
c). 引物濃度：Primer Mix 中包含多對引物，通常每條引物終濃度可以根據情況在 0.1-1.0 μM 間進行調整。
d). 探針濃度：Probe Mix中包含多條不同熒光信號的探針，每條探針的濃度可根據具體情況在50-300 nM間調整。
e). 模板稀釋：qPCR靈敏度高，建議將模板進行稀釋使用，控制Ct值在20-35之間適宜。
f). 反應體系：推薦使用25 μL或50 μL，以保證目的基因擴增的有效性和重復性。
g). 體系配制：請于超凈工作臺內配制，并使用無核酸酶殘留的槍頭、反應管；推薦使用帶濾芯的槍頭；避免交叉污染和氣溶膠污染。
參考擴增程序
2.1 標準程序
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
變性 退火/延伸 | 95℃ |
| 45 |
60℃a | 30 secb |
【注】a. 擴增反應：擴增反應溫度根據設計的引物Tm值進行調整。
b. 熒光信號采集：不同的qPCR檢測儀器所需的熒光信號采集時間不同，請根據最短時間限制進行設置。
2.2 快速程序
循環步驟 | 溫度 | 時間 | 循環數 |
預變性 | 95℃ | 30 sec | 1 |
變性 退火/延伸 | 95℃ |
| 45 |
60℃ | 20 secc |
【注】c. 快速程序：實際使用的qPCR檢測儀器是否支持快速擴增，請進行預實驗確認。
適用機型
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR; SLAN 96S, 96P.
注意事項
1. 實驗過程中請使用RNase free耗材。
2. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
相關產品
-
￥2325
